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SK-MES-1
Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
SK MES 1, SKMES-1, SK-Mes-1, SK-MES1, SKMES1, SK-MES, SKMES

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SK-MES-1

Cell line · Artikelnummer 300339

SK-MES-1 is a human lung squamous cell carcinoma (LSQCC) cell line extensively used in lung cancer research, particularly in studies focusing on the secon...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

SK-MES-1 ist eine menschliche Zelllinie des Plattenepithelkarzinoms der Lunge (LSQCC), die in der Lungenkrebsforschung häufig verwendet wird, insbesondere in Studien, die sich auf den zweithäufigsten Subtyp des nicht-kleinzelligen Lungenkrebses (NSCLC) konzentrieren. SK-MES-1-Zellen zeichnen sich durch eine hohe Mutationsrate im Tumorsuppressorgen p53 aus, die mit ihrer Resistenz gegen Apoptose und verschiedene Chemotherapien in Verbindung gebracht wird. Diese Zelllinie dient als wichtiges Modell für die Evaluierung neuer therapeutischer Strategien gegen Plattenepithelkarzinome der Lunge, insbesondere für Medikamente, die auf den Zellzyklus und apoptotische Wege abzielen.

Studien mit SK-MES-1 haben gezeigt, dass die Zelllinie auf platinhaltige Chemotherapeutika wie Lobaplatin anspricht, die die Apoptose sowohl über den intrinsischen als auch den extrinsischen Weg auslösen. Lobaplatin, ein Platinpräparat der dritten Generation, hemmt nachweislich die Proliferation von SK-MES-1, indem es die S-Phase des Zellzyklus zum Stillstand bringt und die Apoptose durch Hochregulierung pro-apoptotischer Proteine wie Bax und Herunterregulierung anti-apoptotischer Proteine wie Bcl-2 fördert. Darüber hinaus wiesen SK-MES-1-Zellen, die mit Lobaplatin behandelt wurden, eine erhöhte Aktivierung von Caspase-3, -8 und -9 auf, was die Beteiligung der durch Mitochondrien vermittelten Apoptose weiter untermauert.

SK-MES-1 wurde auch verwendet, um die Auswirkungen anderer Verbindungen zu untersuchen, wie Costunolid, eine Phytochemikalie, die über einen von den Mitochondrien abhängigen Weg einen Stillstand des Zellzyklus in der G1/S-Phase und Apoptose auslöst. Die Behandlung mit Costunolid erhöht die Expression von p53 und Bax, während der Bcl-2-Gehalt sinkt und das mitochondriale Membranpotenzial gestört wird, was die Nützlichkeit von SK-MES-1 bei der Untersuchung von Apoptose-bezogenen Signalwegen in Plattenepithelkarzinomen der Lunge bestätigt.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • SK MES 1
  • SKMES-1
  • SK-Mes-1
  • SK-MES1
  • SKMES1
  • SK-MES
  • SKMES

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Karyotyp
Die Stamm-Chromosomenzahl ist hypotriploid, wobei die 2S-Komponente zu 3,2 % vorkommt. Siebzehn bis 20 Markerchromosomen waren in den meisten S-Metaphasen zu finden. Normale x-, 13- und 19-Chromosomen waren nicht vorhanden, und die Chromosomen 2, 3, 14, 17 und 20 waren im Allgemeinen monosomisch. Das Y-Chromosom wurde mit der QM-Färbung nicht nachgewiesen.

04Bezeichner

Quellenangabe
SK-MES-1 (Cytion-Katalognummer 300339)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0630

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
P53 negativ
Isoenzyme
Me-2, 1-2, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0132

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
65 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch