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SK-MEL-2
Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Metastasenherd
Haut des Oberschenkels
Synonyme
SK-Mel-2, SK-Mel 2, SK-mel-2, SK-MEL2, SK.MEL.2, SK Mel 2, SK MEL 2, SKMEL-2, SKMEL2, SKmel2, SK-ML2, SKml2

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SK-MEL-2

Cell line · Artikelnummer 300423

Introducing SK-MEL-2 cells, a cell line derived from a 60-year-old, White, male patient with malignant melanoma. These cells express wildtype B-Raf and mutan...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Wir stellen SK-MEL-2-Zellen vor, eine Zelllinie, die von einem 60-jährigen, weißen, männlichen Patienten mit malignem Melanom stammt. Diese Zellen exprimieren Wildtyp B-Raf und mutiertes N-Ras (Q61R). Mit einer Verdopplungszeit von 32 Stunden sind die SK-MEL-2-Zellen ein wertvolles Instrument für die Untersuchung von Melanomen. Ein Melanom entsteht, wenn in Melanozyten Mutationen auftreten, die zu einer unkontrollierten Vermehrung und Krebsentwicklung führen. Durch die Verwendung von SK-MEL-2-Zellen können Forscher Einblicke in die Mechanismen des Melanoms gewinnen und mögliche Behandlungen erforschen.
Gewebe
Haut
Krankheit
Melanom
Metastasenherd
Haut des Oberschenkels
Synonyme
  • SK-Mel-2
  • SK-Mel 2
  • SK-mel-2
  • SK-MEL2
  • SK.MEL.2
  • SK Mel 2
  • SK MEL 2
  • SKMEL-2
  • SKMEL2
  • SKmel2
  • SK-ML2
  • SKml2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Polygonal
Tumorauslösend
Ja, in Nacktmäusen. Bildet ein malignes Melanom
Karyotyp
(P6) hypodiploid bis hypertetraploid mit Anomalien wie Dizentrik, sekundären Einschnürungen und großen telozentrischen Markern. Phänotyp Häufigkeit Produkt: 0.0742

04Bezeichner

Quellenangabe
SK-MEL-2 (Cytion-Katalognummer 300423)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0069

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B
Produkte
Melanin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
60 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch