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HEK293-GPRC5D
Tissue
Riñón fetal
Disease
Transformado/inmortalizado; no tumorigénico (linaje HEK293)

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HEK293-GPRC5D

Cell line · Product number 305989

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes académicos o sin fines de lucro. Para entidades comerciales, el precio es de aproximadamente 6 250 €.
Si representa a una entidad comercial o no está seguro de a qué categoría pertenece, por favor contáctenos.


Las células HEK293-GPRC5D son células renales embrionarias humanas 293 (HEK293) modificadas genéticamente para expresar de manera estable el receptor humano de la familia de receptores acoplados a proteínas G, grupo C, miembro 5, tipo D (GPRC5D), un receptor huérfano que pertenece a la familia de receptores acoplados a proteínas G de clase C. El GPRC5D presenta una expresión muy limitada en los tejidos normales, y se ha descrito su expresión predominante en los folículos pilosos, los tejidos queratinizados y las células plasmáticas. Es importante destacar que el receptor se expresa en altos niveles en el mieloma múltiple y en ciertas otras neoplasias de células plasmáticas, donde su distribución limitada en los tejidos normales y su fuerte expresión asociada a los tumores lo han convertido en un objetivo destacado para el desarrollo de inmunoterapias, particularmente en pacientes que sufren una recaída tras recibir terapias dirigidas contra el BCMA.

Las células HEK293-GPRC5D se utilizan ampliamente en la investigación en oncología hematológica y en el desarrollo terapéutico para la caracterización de anticuerpos monoclonales dirigidos contra GPRC5D, activadores bispecíficos de células T, conjugados de anticuerpos y fármacos, y terapias con células CAR-T o CAR-NK. El sistema de expresión recombinante estable permite la evaluación cuantitativa de la afinidad de unión al antígeno, la ocupación del receptor, la densidad de expresión en la superficie, la especificidad del epítopo y la citotoxicidad dependiente del objetivo. Estas células son particularmente valiosas para evaluar la actividad y la selectividad de las terapias con células inmunitarias modificadas genéticamente y de los productos biológicos de redireccionamiento de células T dirigidos a neoplasias GPRC5D-positivas. Otras aplicaciones incluyen el desarrollo de ensayos de citometría de flujo, ensayos con marcadores, cribado de alto rendimiento y la validación de agentes de imagen específicos para receptores o reactivos de diagnóstico.

Tissue
Riñón fetal
Disease
Transformado/inmortalizado; no tumorigénico (linaje HEK293)
Applications
Desarrollo de anticuerpos dirigidos contra GPRC5D y anticuerpos biespecíficos; tratamientos para el mieloma múltiple; terapia con células CAR-T; ensayos de ADCC/CDC; citometría de flujo; cribado en inmuno-oncología

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliales
Doubling time
aprox. 24-36 horas

04Identifiers

Citation
HEK293-GPRC5D (número de catálogo de Cytion 305989)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6G25

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
GPRC5D

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Complemente el medio con un 10 % de FBS, 1 mM de piruvato de sodio, 10 mM de HEPES y un 1 % de NEAA. Agregue Geneticin (G418-Sulfat) hasta alcanzar una concentración final de 1 mg/mL.
Dissociation reagent
Tripsina-EDTA
Subculturing
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspira el medio de cultivo usado de las células adherentes y lávalas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, agrega el volumen adecuado de solución de tripsina/EDTA según el tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un frasco T25, 3 ml para un frasco T75) e incube a temperatura ambiente o a 37 °C hasta que las células se desprendan (5 a 10 minutos). Observe el desprendimiento bajo el microscopio y, si es necesario, golpee suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, agregue medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspenda suavemente las células y transfiera una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Coloca el recipiente en una incubadora ajustada a 37 °C con un 5 % de CO₂, y cambia el medio cada 2 a 3 días.
Split ratio
Del 1 al 5
Seeding density
De 2 a 4 × 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
De 2 a 3 veces por semana
Post-thaw recovery

Después de descongelar, divida las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en frascos T25 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (en el caso de cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Donor age
Feto