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HEK293-GPRC5D
Tissue
Rim fetal
Disease
Transformadas/imortalizadas; não tumorigênicas (linha celular HEK293)

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HEK293-GPRC5D

Cell line · Product number 305989

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

Aviso legal: Os preços exibidos para as linhagens celulares destinam-se exclusivamente a clientes acadêmicos ou sem fins lucrativos. Para entidades comerciais, o preço é de aproximadamente €6.250.
Se você representa uma entidade comercial ou não tem certeza de qual categoria se aplica, por favor, entre em contato conosco.


As células HEK293-GPRC5D são células renais embrionárias humanas 293 (HEK293) modificadas geneticamente para expressar de forma estável o receptor humano da família C, grupo 5, membro D, acoplado à proteína G (GPRC5D), um receptor órfão pertencente à família dos receptores acoplados à proteína G da classe C. O GPRC5D apresenta expressão altamente restrita em tecidos normais, com expressão predominante relatada em folículos capilares, tecidos queratinizados e células plasmáticas. É importante ressaltar que o receptor é altamente expresso no mieloma múltiplo e em certas outras neoplasias de células plasmáticas, onde sua distribuição limitada nos tecidos normais e sua expressão robusta associada a tumores o tornaram um alvo proeminente para o desenvolvimento de imunoterapias, particularmente em pacientes com recidiva após terapias direcionadas ao BCMA.

As células HEK293-GPRC5D são amplamente utilizadas na pesquisa em oncologia hematológica e no desenvolvimento terapêutico para a caracterização de anticorpos monoclonais direcionados ao GPRC5D, engajadores bispecíficos de células T, conjugados de anticorpo-fármaco e terapias com células CAR-T ou CAR-NK. O sistema de expressão recombinante estável permite a avaliação quantitativa da afinidade de ligação ao antígeno, ocupação do receptor, densidade de expressão na superfície, especificidade do epítopo e citotoxicidade dependente do alvo. Essas células são particularmente valiosas para avaliar a atividade e a seletividade de terapias com células imunes modificadas e produtos biológicos de redirecionamento de células T direcionados a neoplasias GPRC5D-positivas. Outras aplicações incluem o desenvolvimento de ensaios de citometria de fluxo, ensaios com repórteres, triagem de alto rendimento e validação de agentes de imagem específicos para receptores ou reagentes diagnósticos.

Tissue
Rim fetal
Disease
Transformadas/imortalizadas; não tumorigênicas (linha celular HEK293)
Applications
Desenvolvimento de anticorpos direcionados ao GPRC5D e de anticorpos bispecíficos; terapêuticas para o mieloma múltiplo; terapia com células CAR-T; ensaios de ADCC/CDC; citometria de fluxo; triagem imuno-oncológica

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HEK293 cell line contains a GPRC5D expression construct for multiple myeloma antigen studies and targeted therapy development. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Células epiteliais
Doubling time
aprox. 24-36 horas

04Identifiers

Citation
HEK293-GPRC5D (número de catálogo da Cytion 305989)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6G25

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
GPRC5D

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione ao meio 10% de FBS, 1 mM de piruvato de sódio, 10 mM de HEPES e 1% de NEAA. Adicione Geneticin (G418-Sulfat) para atingir uma concentração final de 1 mg/mL.
Dissociation reagent
Tripsina-EDTA
Subculturing
Para cultura de células aderentes de rotina: Aspire o meio de cultura antigo das células aderentes e lave-as com PBS para remover qualquer resíduo de meio. Após aspirar o PBS, adicione o volume apropriado de solução de tripsina/EDTA com base no tamanho do recipiente de cultura (por exemplo, 1 ml para um frasco T25, 3 ml para um frasco T75) e incube à temperatura ambiente ou a 37 °C até que as células se desprendam (5 a 10 minutos). Monitore o desprendimento ao microscópio e bata suavemente no recipiente, se necessário, para liberar as células. Uma vez desprendidas, adicione meio completo para inativar a tripsina/EDTA, ressuspenda delicadamente as células e transfira uma alíquota da suspensão celular para um novo recipiente de cultura contendo meio fresco. Coloque o recipiente em uma incubadora ajustada para 37 °C com 5% de CO₂ e troque o meio a cada 2 a 3 dias.
Split ratio
1 a 5
Seeding density
2 a 4 x 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery

Após o descongelamento, divida as células na proporção de 1:2 a 1:3 em frascos T25 e deixe que as células se recuperem do processo de congelamento e se fixem (no caso de culturas aderentes) por pelo menos 24 horas.

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
Feto