HK-2xZFN-mEGFP-Nup107

La línea celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 es una variante modificada genéticamente de la línea celular Hela Kyoto, derivada de células de cáncer de cuello uterino humano. Esta línea celular ha sido modificada mediante la tecnología de nucleasas de dedo de zinc (ZFN) para integrar la proteína fluorescente verde mejorada monomérica (mEGFP) en el gen Nup107, un componente crucial del complejo de poros nucleares (NPC). Nup107 desempeña un papel clave en el transporte nucleocitoplasmático, esencial para la homeostasis celular y la regulación génica.

La integración de la mEGFP permite visualizar y rastrear la Nup107, lo que facilita los estudios sobre la dinámica y las funciones del NPC. Este marcaje fluorescente ayuda a comprender la distribución espacial y temporal de la Nup107, así como sus interacciones con otras nucleoporinas y factores de transporte. La línea celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 es de un valor incalculable para investigar los mecanismos de transporte celular y la fisiopatología de las enfermedades.

Esta línea celular ofrece un modelo sólido para estudiar el complejo funcionamiento del NPC y sus implicaciones en la salud y la enfermedad, combinando la estabilidad genética y el origen humano de las células Hela Kyoto con ingeniería genética avanzada.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.