Skip to content
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107
Tissue
צוואר הרחם
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
מיקום הגידול הראשוני (חלקו הפנימי של צוואר הרחם)

Documents

HK-2xZFN-mEGFP-Nup107

Cell line · Product number 300676

The HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 cell line is a genetically engineered variant of the Hela Kyoto cell line, derived from human cervical cancer cells. This cell l...

US$800.00excl. tax and shipping
Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 הוא וריאנט מהונדס גנטית של קו התאים Hela Kyoto, שמקורו בתאי סרטן צוואר הרחם האנושי. קו תאים זה שונה באמצעות טכנולוגיית Zinc Finger Nuclease (ZFN) כדי לשלב חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (mEGFP) בגן Nup107, מרכיב חיוני במכלול נקבוביות הגרעין (NPC). Nup107 ממלא תפקיד מרכזי בהובלה בין הגרעין לציטופלזמה, החיונית להומאוסטזיס התאי ולויסות גנים.

שילוב ה-mEGFP מאפשר הדמיה ומעקב אחר Nup107, מה שמקל על מחקרים על הדינמיקה והתפקודים של ה-NPC. תיוג פלואורסצנטי זה מסייע בהבנת התפלגותו המרחבית והזמנית של Nup107 והאינטראקציות שלו עם נוקליופורינים וגורמי הובלה אחרים. קו התאים HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 הוא בעל ערך רב למחקר מנגנוני הובלה תאיים ופתופיזיולוגיה של מחלות.

קו תאים זה מספק מודל יציב לחקר פעולתו המורכבת של ה-NPC והשלכותיו על הבריאות והמחלות, ומשלב את היציבות הגנטית והמקור האנושי של תאי Hela Kyoto עם הנדסה גנטית מתקדמת.

Tissue
צוואר הרחם
Disease
אדנוקרצינומה
Metastatic site
מיקום הגידול הראשוני (חלקו הפנימי של צוואר הרחם)
Applications
ביולוגיה של קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות (NPC); הדמיה של קומפלקס Nup107/Y; הובלה גרעינית-ציטופלזמית; הדמיה של תאים חיים באמצעות mEGFP; דינמיקה של ה-NPC; אימות עריכת גנום באמצעות ZFN

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the Nup107 locus enabling nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
תאים דמויי אפיתל בצורת אבן פסיפס
Cell type
תאי אפיתל

04Identifiers

Citation
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 (מספר קטלוגי Cytion 300676)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_VL12
Depositor
מעבדת אלנברג (EMBL)

05Expression and susceptibility

Products
EGFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר) Nup107

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
30 שנה
Ethnicity
אפרו-אמריקאי