.jpg)
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Metastatic site
- מיקום הגידול הראשוני (חלקו הפנימי של צוואר הרחם)
Documents
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107
Cell line · Product number 300676
The HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 cell line is a genetically engineered variant of the Hela Kyoto cell line, derived from human cervical cancer cells. This cell l...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 הוא וריאנט מהונדס גנטית של קו התאים Hela Kyoto, שמקורו בתאי סרטן צוואר הרחם האנושי. קו תאים זה שונה באמצעות טכנולוגיית Zinc Finger Nuclease (ZFN) כדי לשלב חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר (mEGFP) בגן Nup107, מרכיב חיוני במכלול נקבוביות הגרעין (NPC). Nup107 ממלא תפקיד מרכזי בהובלה בין הגרעין לציטופלזמה, החיונית להומאוסטזיס התאי ולויסות גנים.
שילוב ה-mEGFP מאפשר הדמיה ומעקב אחר Nup107, מה שמקל על מחקרים על הדינמיקה והתפקודים של ה-NPC. תיוג פלואורסצנטי זה מסייע בהבנת התפלגותו המרחבית והזמנית של Nup107 והאינטראקציות שלו עם נוקליופורינים וגורמי הובלה אחרים. קו התאים HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 הוא בעל ערך רב למחקר מנגנוני הובלה תאיים ופתופיזיולוגיה של מחלות.
קו תאים זה מספק מודל יציב לחקר פעולתו המורכבת של ה-NPC והשלכותיו על הבריאות והמחלות, ומשלב את היציבות הגנטית והמקור האנושי של תאי Hela Kyoto עם הנדסה גנטית מתקדמת.
- Tissue
- צוואר הרחם
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Metastatic site
- מיקום הגידול הראשוני (חלקו הפנימי של צוואר הרחם)
- Applications
- ביולוגיה של קומפלקס הנקבוביות הגרעיניות (NPC); הדמיה של קומפלקס Nup107/Y; הובלה גרעינית-ציטופלזמית; הדמיה של תאים חיים באמצעות mEGFP; דינמיקה של ה-NPC; אימות עריכת גנום באמצעות ZFN
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the Nup107 locus enabling nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- תאים דמויי אפיתל בצורת אבן פסיפס
- Cell type
- תאי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 (מספר קטלוגי Cytion 300676)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL12
- Depositor
- מעבדת אלנברג (EMBL)
05Expression and susceptibility
- Products
- EGFP (חלבון פלואורסצנטי ירוק משופר) Nup107
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 30 שנה
- Ethnicity
- אפרו-אמריקאי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Third-party agreements apply
- Yes