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HK-2xZFN-mEGFP-Nup107
Cell line · Product number 300676
The HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 cell line is a genetically engineered variant of the Hela Kyoto cell line, derived from human cervical cancer cells. This cell l...
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01General information
- Description
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 細胞系是 Hela Kyoto 細胞系的基因工程變異體，源自人類子宮頸癌細胞。 該細胞系已透過鋅指核酸酶（ZFN）技術進行改造，將單體增強型綠色螢光蛋白（mEGFP）整合至 Nup107 基因中，而 Nup107 是核孔複合體（NPC）的關鍵組成部分。 Nup107 在核質運輸中扮演關鍵角色，對細胞內穩態和基因調控至關重要。
mEGFP 的整合使 Nup107 得以被視覺化並進行追蹤，從而促進對核孔複合體（NPC）動態與功能的研究。這種螢光標記有助於理解 Nup107 的時空分布，以及其與其他核孔蛋白和運輸因子的相互作用。 HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 細胞系對於研究細胞運輸機制及疾病的病理生理學具有無可替代的價值。
該細胞系結合了 Hela Kyoto 細胞的遺傳穩定性與人類來源特性，並運用先進的基因工程技術，為研究 NPC 的複雜運作機制及其對健康與疾病的影響，提供了一個穩健的模型。
- Tissue
- 子宮頸內口
- Disease
- 腺癌
- Metastatic site
- 原發性腫瘤部位（子宮頸管內）
- Applications
- 核孔複合體（NPC）生物學；Nup107/Y-複合體成像；核質運輸；mEGFP 活細胞顯微觀察；NPC 動態；ZFN 基因組編輯驗證
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the Nup107 locus enabling nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 呈馬賽克狀石塊形狀的類上皮細胞
- Cell type
- 上皮細胞
04Identifiers
- Citation
- HK-2xZFN-mEGFP-Nup107（Cytion 型號 300676）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL12
- Depositor
- 艾倫伯格實驗室（EMBL）
05Expression and susceptibility
- Products
- EGFP（增強型綠色螢光蛋白）Nup107
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 30年
- Ethnicity
- 非裔美國人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Third-party agreements apply
- Yes