- Tissue
- Retículo
- Disease
- Sarcoma
- Synonyms
- J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1
Documents
J774A.1
Cell line · Product number 400220
The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
La línea celular J774A.1 se obtuvo a partir del tumor ascítico de una ratona BALB/c/NIH durante un tratamiento inductor de plasmocitoma. Estas células son conocidas por su capacidad para realizar fagocitosis dependiente de anticuerpos, lo que las convierte en una herramienta útil para investigar las respuestas inmunitarias a diversos antígenos.
El crecimiento de las células J774A.1 se ve inhibido por diversas sustancias, entre ellas el sulfato de dextrano, la p-fenilendiamina (PPD) y el lipopolisacárido (LPS). Las células J774A.1 sintetizan grandes cantidades de lisozima y se sabe que sintetizan interleucina-1 beta de manera continua.
Las células J774A.1 tienen un tiempo de duplicación de 17 horas y pueden cultivarse en las mismas condiciones que los macrófagos RAW 264.7. Además, se sabe que la línea celular J774A.1 expresa genes específicos, entre ellos la interleucina-1 (IL-1) y la lisozima, así como marcadores de expresión específicos, tales como el complemento (C3) y el receptor Fc de alta afinidad para IgG (Fcgr1).La línea celular J774A.1 se ha utilizado en diversos estudios de inmunología y enfermedades infecciosas. Por ejemplo, se ha utilizado para investigar la citotoxicidad de las sales de triazolo[1,5-a]piridinio con actividad leishmanicida y la actividad antitripanosomática de los glucósidos flavonoides aislados de especies de Delphinium.
En general, las células J774A.1 son una herramienta valiosa para estudiar la función de los macrófagos, la síntesis de citocinas y la respuesta inmunitaria ante diversos antígenos y patógenos.
- Tissue
- Retículo
- Disease
- Sarcoma
- Synonyms
- J-774A.1
- J774A1
- J774 A1
- J774A.1
- J 774A.1
- J774 A.1
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- Macrófago
04Identifiers
- Citation
- J774A.1 (número de catálogo de Cytion 400220)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0358
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Inmunoglobulina (Fc), complemento (C3)
- Products
- Interleucina-1 (interleucina 1, IL-1, LAF), lisozima
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glucosa, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sodio (número de artículo de Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Se recomienda desprenderse de las células con un raspador celular. Recoja las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lave suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilice de 3 a 5 ml para frascos T25 y de 5 a 10 ml para frascos T75). Aplique Accutase (1 a 2 ml para frascos T25, 2,5 ml para frascos T75) asegurándose de cubrir completamente la capa celular. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combine y centrifugue tanto la suspensión como las células adherentes. Después de la centrifugación, resuspenda cuidadosamente el sedimento celular y transfiera la suspensión celular a nuevos frascos que contengan medio fresco.
- Seeding density
- 1 x 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- Adulto
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Disclaimer
- Nuestras células se proporcionan exclusivamente con fines de investigación de laboratorio in vitro y no están destinadas a uso clínico ni diagnóstico, ni deben administrarse a seres humanos ni utilizarse con fines veterinarios. Los usuarios deben cumplir con todas las directrices y regulaciones aplicables para la manipulación y el uso de estas células en un entorno de investigación.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes