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J774A.1
Tissue
Réticulum
Disease
Sarcome
Synonyms
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

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J774A.1

Cell line · Product number 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

US$395.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire J774A.1 a été isolée à partir d’une tumeur ascitique d’une souris femelle de souche BALB/c/NIH au cours d’un traitement visant à induire un plasmocytome. Ces cellules sont connues pour leur capacité à effectuer une phagocytose dépendante des anticorps, ce qui en fait un outil utile pour l’étude des réponses immunitaires à divers antigènes.

La croissance des cellules J774A.1 est inhibée par diverses substances, notamment le sulfate de dextrane, la p-phénylènediamine (PPD) et le lipopolysaccharide (LPS). Les cellules J774A.1 synthétisent de grandes quantités de lysozyme et sont connues pour synthétiser l’interleukine-1 bêta de façon continue.
Les cellules J774A.1 ont un temps de doublement de 17 heures et peuvent être cultivées dans les mêmes conditions que les macrophages RAW 264.7. De plus, la lignée cellulaire J774A.1 est connue pour exprimer des gènes spécifiques, notamment l’interleukine-1 (IL-1) et le lysozyme, ainsi que des marqueurs d’expression spécifiques, tels que le complément (C3) et le récepteur Fc à haute affinité pour l’IgG (Fcgr1).

La lignée cellulaire J774A.1 a été utilisée dans diverses études en immunologie et en maladies infectieuses. Par exemple, elle a servi à étudier la cytotoxicité des sels de triazolo[1,5-a]pyridinium dotés d’une activité léishmanicide, ainsi que l’activité antitrypanosomique des glycosides flavonoïques isolés d’espèces de Delphinium.

Dans l’ensemble, les cellules J774A.1 constituent un outil précieux pour l’étude de la fonction des macrophages, de la synthèse des cytokines et de la réponse immunitaire à divers antigènes et agents pathogènes.

Tissue
Réticulum
Disease
Sarcome
Synonyms
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Macrophage

04Identifiers

Citation
J774A.1 (numéro de catalogue Cytion 400220)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Immunoglobuline (Fc), complément (C3)
Products
Interleukine-1 (interleukine 1, IL-1, LAF), lysozyme

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Il est recommandé de détacher les cellules à l’aide d’un grattoir cellulaire. Recueillir la suspension cellulaire dans un tube de 15 ml et laver délicatement les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (utiliser 3 à 5 ml pour les flacons T25 et 5 à 10 ml pour les flacons T75). Appliquez de l’Accutase (1 à 2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à bien recouvrir toute la couche cellulaire. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l’incubation, combinez la suspension et les cellules adhérentes, puis centrifugez le tout. Après la centrifugation, remettez soigneusement le culot cellulaire en suspension et transférez la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Seeding density
1 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Adulte