Skip to content
J774A.1
Tissue
เรติคูลัม
Disease
ซาร์โคมา
Synonyms
J-774A.1, J774A1, J774 A1, J774A.1, J 774A.1, J774 A.1

Documents

J774A.1

Cell line · Product number 400220

The J774A.1 cell line was derived from the ascites tumour of a female BALB/c/NIH mouse during plasmacytoma-inducing treatment. The cells are known for the...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ J774A.1 ถูกแยกได้จากเนื้องอกในช่องท้องของหนูเพศเมียสายพันธุ์ BALB/c/NIH ระหว่างการรักษาด้วยสารเหนี่ยวนำพลาสมาไซโตมา เซลล์ชนิดนี้เป็นที่รู้จักกันดีในความสามารถในการทำฟาโกไซโทซิสแบบพึ่งพาแอนติบอดี จึงเป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์ในการศึกษาการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันต่อแอนติเจนต่าง ๆ

การเจริญเติบโตของเซลล์ J774A.1 ถูกยับยั้งโดยสารต่างๆ รวมถึงเดกซ์ทรานซัลเฟต, พี-ฟีนิลีนไดอะมีน (PPD), และลิโพโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS) เซลล์ J774A.1 ผลิตไลโซไซม์ในปริมาณมากและเป็นที่รู้จักว่าสามารถสังเคราะห์อินเตอร์ลิวคิน-1 เบตาอย่างต่อเนื่อง
เซลล์ J774A.1 มีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า 17 ชั่วโมง และสามารถเพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะเดียวกันกับแมคโครฟาจ RAW 264.7นอกจากนี้ สายเซลล์ J774A.1 ยังเป็นที่ทราบกันดีว่ามีการแสดงออกของยีนเฉพาะ รวมถึงอินเตอร์ลิวคิน-1 (IL-1) และไลโซไซม์ ตลอดจนตัวบ่งชี้การแสดงออกเฉพาะ เช่น คอมพลีเมนต์ (C3) และตัวรับ Fc ที่มีความจำเพาะสูงต่อ IgG (Fcgr1)

เซลล์ไลน์ J774A.1 ได้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาด้านภูมิคุ้มกันและโรคติดเชื้อต่าง ๆ ตัวอย่างเช่น ได้ถูกใช้ในการศึกษาความเป็นพิษต่อเซลล์ของเกลือไทรอาโซโล[1,5-a]ไพริดิเนียมที่มีฤทธิ์ฆ่าเชื้อเลิชมาเนีย และฤทธิ์ต้านทริปปาโนโซมาของฟลาโวนอยด์ไกลโคไซด์ที่แยกได้จากพืชสกุล Delphinium

โดยรวมแล้ว เซลล์ J774A.1 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาการทำงานของแมคโครฟาจ การสังเคราะห์ไซโตไคน์ และการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันต่อแอนติเจนและเชื้อโรคต่างๆ

Tissue
เรติคูลัม
Disease
ซาร์โคมา
Synonyms
  • J-774A.1
  • J774A1
  • J774 A1
  • J774A.1
  • J 774A.1
  • J774 A.1

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
มาโครฟาจ

04Identifiers

Citation
J774A.1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400220)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0358

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
อิมมูโนโกลบูลิน (เอฟซี), คอมเพล็กซ์ (ซี3)
Products
อินเตอร์ลิวคิน-1 (อินเตอร์ลิวคิน 1, IL-1, LAF), ไลโซไซม์

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
แนะนำให้ใช้เครื่องขูดเซลล์เพื่อแยกเซลล์ออกจากพื้นผิว รวบรวมเซลล์แขวนลอยในหลอดขนาด 15 มล. และล้างเซลล์ที่ติดอยู่เบา ๆ ด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มล. สำหรับขวด T25 และ 5-10 มล. สำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) มาใช้ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากบ่มแล้ว ให้รวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้แขวนเซลล์ตะกอนอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
ผู้ใหญ่