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B-LCL-HROG02
Tissue
Sang périphérique
Disease
Lignée cellulaire lymphoblastoïde B transformée par l’EBV (B-LCL); donneur atteint d’un cancer de l’estomac

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B-LCL-HROG02

Cell line · Product number 302106

B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...

US$777.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

La lignée cellulaire B-LCL-HROG02 est une lignée de cellules lymphoblastoïdes B humaines transformées par le virus d’Epstein-Barr (EBV) (B-LCL) établie à partir du sang périphérique d’un patient de sexe masculin de type caucasien âgé de 68 ans atteint d’un cancer de l’estomac, issu de la série de la biobanque HROG, qui correspond à la collection de B-LCL de cancer de l’estomac de la collection HROC de cancer colorectal. L’immortalisation in vitro des lymphocytes B primaires du sang périphérique, induite par l’EBV, a permis d’obtenir une lignée cellulaire en suspension à prolifération stable, présentant une morphologie de type lymphoblaste. Les cellules HROG02 expriment de manière constitutive les antigènes de latence de l’EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) ainsi que des niveaux élevés de molécules HLA de classe I et II, des molécules co-stimulatrices CD80 et CD86, des molécules d’adhésion CD54 et CD58, et des marqueurs des cellules B CD19, CD20 et CD23.

La lignée B-LCL-HROG02 est utilisée dans les tests fonctionnels des cellules T et des cellules NK, le typage HLA, les réactions lymphocytaires mixtes, les études sur la présentation des antigènes et les protocoles d’induction des lymphocytes T cytotoxiques (CTL). Au sein de la biobanque HROG appariée aux patients, elle fournit une référence immunologique définie pour la recherche sur le cancer de l’estomac, permettant des études autologues ou allogéniques des réponses immunitaires associées à la tumeur. Cette lignée soutient les recherches sur la réactivité des cellules T spécifiques au cancer de l’estomac et les systèmes de tests immunologiques appariés aux patients pertinents pour l’immunologie des tumeurs gastriques.

Tissue
Sang périphérique
Disease
Lignée cellulaire lymphoblastoïde B transformée par l’EBV (B-LCL); donneur atteint d’un cancer de l’estomac
Applications
Recherche en immunologie; tests sur les cellules T et les cellules NK; typage HLA; études sur la présentation des antigènes; réactions lymphocytaires mixtes; cellules cibles pour les tests CTL; immunologie du cancer de l'estomac

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Suspension
GMO status
GMO-S2
GMO status details
GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
De type lymphoblaste
Cell type
Lymphoblaste B
Doubling time
de 24 à 48 heures

04Identifiers

Citation
B-LCL-HROG02 (numéro de catalogue Cytion 302106)
NCBI TaxID
9606

05Expression and susceptibility

Viruses
Transformant : EBV

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, contenant 2,0 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 15 à 20 % de FBS au milieu de culture
Subculturing
Diluez la culture à une concentration de 2 à 5 × 10⁵ cellules/ml avec du milieu complet frais et préchauffé tous les 2 à 3 jours. Comptez les cellules viables avant le repiquage afin de maintenir une densité optimale. Ne laissez pas les cultures dépasser 2 × 10⁶ cellules/ml. Une centrifugation (300 × g, 5 min) peut être effectuée pour renouveler le milieu au besoin. Aucune dissociation enzymatique n’est requise.
Split ratio
1 à 4
Seeding density
de 2 à 5 × 10⁵ cellules/ml
Fluid renewal
Tous les 2 ou 3 jours
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
68 ans
Ethnicity
caucasien