
- Tissue
- Sangue periférico
- Disease
- Linha celular linfoblastoide B transformada pelo EBV (B-LCL); doador com câncer gástrico
Documents
B-LCL-HROG02
Cell line · Product number 302106
B-LCL-HROG02 is a human Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B lymphoblastoid cell line (B-LCL) established from the peripheral blood of a 68-year-old Cau...
01General information
- Description
A B-LCL-HROG02 é uma linhagem celular linfoblastoide B transformada pelo vírus de Epstein-Barr (EBV) humano (B-LCL) estabelecida a partir do sangue periférico de um paciente caucasiano de 68 anos com câncer gástrico, pertencente à série do biobanco HROG, que corresponde à coleção de B-LCL de câncer gástrico da série HROC de câncer colorretal. A imortalização in vitro mediada pelo EBV de linfócitos B primários do sangue periférico gerou uma linhagem celular em suspensão que se prolifera de forma estável, com morfologia semelhante à de linfoblastos. As células HROG02 expressam constitutivamente antígenos de latência do EBV (EBNA-1, -2, -3, LMP-1, -2) e altos níveis de moléculas HLA de classe I e II, moléculas coestimuladoras CD80 e CD86, moléculas de adesão CD54 e CD58, e marcadores de células B CD19, CD20 e CD23.
A B-LCL-HROG02 é utilizada em ensaios funcionais de células T e células NK, tipagem de HLA, reações de linfócitos mistos, estudos de apresentação de antígenos e protocolos de indução de CTL. Dentro do biobanco HROG, que conta com amostras correspondentes aos pacientes, ela fornece uma referência imunológica definida para a pesquisa do câncer gástrico, possibilitando estudos autólogos ou alogênicos das respostas imunes associadas ao tumor. A linhagem apoia investigações sobre a reatividade das células T específicas para o câncer gástrico e sistemas de ensaios imunológicos correspondentes aos pacientes, relevantes para a imunologia do tumor gástrico.
- Tissue
- Sangue periférico
- Disease
- Linha celular linfoblastoide B transformada pelo EBV (B-LCL); doador com câncer gástrico
- Applications
- Pesquisa em imunologia; ensaios com células T e células NK; tipagem de HLA; estudos sobre apresentação de antígenos; reações linfocitárias mistas; células-alvo para ensaios de CTL; imunologia do câncer gástrico
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- GMO status
- GMO-S2
- GMO status details
- GMO-S2: This B-LCL contains a stably maintained EBV episome encoding viral latent-phase genes (EBNA-1/-2/-3, LMP-1/-2). EBV is classified as a risk group 2 pathogen. Handling requires BSL-2 containment. This classification applies within Germany; regulations may differ in other jurisdictions.
- Biosafety level
- 2
03Characteristics
- Morphology
- Do tipo linfoblasto
- Cell type
- Linfoblasto B
- Doubling time
- 24 a 48 horas
04Identifiers
- Citation
- B-LCL-HROG02 (número de catálogo da Cytion 302106)
- NCBI TaxID
- 9606
05Expression and susceptibility
- Viruses
- Transformante: EBV
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione ao meio 15–20% de FBS
- Subculturing
- Dilua a cultura para 2–5 × 10⁵ células/ml com meio completo fresco e pré-aquecido a cada 2–3 dias. Conte as células viáveis antes da passagem para manter a densidade ideal. Não permita que as culturas excedam 2 × 10⁶ células/ml. A centrifugação (300 × g, 5 min) pode ser utilizada para trocar o meio quando necessário. Não é necessária dissociação enzimática.
- Split ratio
- 1 a 4
- Seeding density
- 2 a 5 × 10⁵ células/ml
- Fluid renewal
- A cada 2 ou 3 dias
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo + 10% de DMSO para garantir uma viabilidade adequada após o descongelamento.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 68 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Third-party agreements apply
- Yes