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BNL CL.2
Tissue
Foie
Synonyms
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

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BNL CL.2

Cell line · Product number 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

US$550.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

La lignée cellulaire BNL CL.2, une lignée de cellules hépatiques de souris dérivée à l’origine de cellules hépatiques embryonnaires de souche BALB/c, joue un rôle important dans l’étude de la biologie cellulaire et des mécanismes moléculaires, notamment en ce qui concerne le cycle cellulaire et sa régulation. Les chercheurs ont largement utilisé la lignée BNL CL.2 pour caractériser les complexes protéiques des kinases dépendantes des cyclines (CDK) et étudier les altérations de ces complexes à la suite d’une transformation tant chimique que virale. Cette lignée sert de lignée mère à diverses lignées cellulaires transformées, telles que BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 et BNL SV A.8, qui proviennent toutes de BNL CL.2 et se sont révélées essentielles pour l’étude des altérations des CDK après transformation.

La lignée BNL CL.2 se distingue par son caractère non tumorigène lorsqu’elle est testée chez des souris immunodéprimées, ainsi que par son incapacité à se développer de manière indépendante de l’ancrage, bien qu’elle possède la capacité de former des colonies dans des milieux semi-solides. Cela en fait un modèle inestimable pour l’étude des processus cellulaires et des transformations dans un environnement contrôlé. En revanche, ses lignées dérivées, telles que celles transformées par l’époxyde de 3-méthylcholanthrène, le MNNG et le SV40, démontrent leur capacité à se développer dans de l’agar mou et à former des tumeurs chez des souris immunodéficientes, ce qui met en évidence l’impact des altérations génétiques et environnementales sur le comportement cellulaire. La lignée cellulaire BNL CL.2 et ses dérivés continuent de constituer une base solide pour la recherche sur la transformation cellulaire, la transfection cellulaire stable et les domaines connexes de la biologie cellulaire et moléculaire.

Tissue
Foie
Synonyms
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Épithélial
Tumourigenic
Non, ces cellules ne se sont pas révélées tumorigènes chez les souris immunodéprimées, mais elles ont formé des colonies dans un milieu semi-solide.

04Identifiers

Citation
BNL CL.2 (numéro de catalogue Cytion 305177)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
Embryon