Skip to content
BNL CL.2
Tissue
ตับ
Synonyms
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

Documents

BNL CL.2

Cell line · Product number 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

BNL CL.2 ซึ่งเป็นสายพันธุ์เซลล์ตับของหนูที่พัฒนามาจากเซลล์ตับของตัวอ่อน BALB/c มีบทบาทสำคัญในการศึกษาชีววิทยาของเซลล์และกลไกโมเลกุล โดยเฉพาะอย่างยิ่งในวงจรเซลล์และการควบคุมวงจรเซลล์ นักวิจัยได้ใช้ BNL CL.2 อย่างกว้างขวางในการศึกษาลักษณะของโปรตีนคอมเพล็กซ์ที่ขึ้นอยู่กับไซคลิน-ดีเพนเดนท์ไคเนส (CDK) และตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงในคอมเพล็กซ์เหล่านี้หลังจากการเปลี่ยนแปลงทางเคมีและไวรัสสายเซลล์นี้เป็นต้นกำเนิดของสายเซลล์ที่เปลี่ยนแปลงต่างๆ เช่น BNL 1ME A.7R.1, BNL 1NG A.2 และ BNL SV A.8 ซึ่งทั้งหมดมีต้นกำเนิดจาก BNL CL.2 และได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงของ CDK หลังการเปลี่ยนแปลง

BNL CL.2 โดดเด่นด้วยลักษณะที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกเมื่อทดสอบในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกัน และไม่สามารถเจริญเติบโตแบบไม่ยึดเกาะได้ แม้ว่ามันจะมีศักยภาพในการสร้างโคโลนีในสื่อกึ่งแข็งก็ตาม สิ่งนี้ทำให้มันเป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าในการสำรวจกระบวนการของเซลล์และการเปลี่ยนแปลงในสภาพแวดล้อมที่ควบคุมได้ในทางตรงกันข้าม สายอนุพันธ์ของมัน เช่น สายที่ถูกเปลี่ยนแปลงโดย 3-Methylcholanthrene epoxide, MNNG และ SV40 แสดงความสามารถในการเจริญเติบโตในวุ้นอ่อนและก่อตัวเป็นเนื้องอกในหนูที่ขาดภูมิคุ้มกัน ซึ่งเน้นย้ำถึงผลกระทบของการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมและสิ่งแวดล้อมต่อพฤติกรรมของเซลล์ สายเซลล์ BNL CL.2 และสายอนุพันธ์ของมันยังคงเป็นรากฐานที่แข็งแกร่งสำหรับการวิจัยในด้านการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ การถ่ายโอนยีนในเซลล์อย่างคงตัว และสาขาที่เกี่ยวข้องในชีววิทยาเซลล์และชีววิทยาระดับโมเลกุล

Tissue
ตับ
Synonyms
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ไม่, เซลล์ไม่ได้ก่อให้เกิดเนื้องอกในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกัน แต่สามารถสร้างโคโลนีในอาหารเลี้ยงเชื้อแบบกึ่งแข็งได้

04Identifiers

Citation
BNL CL.2 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305177)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
เอ็มบริโอ