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BNL CL.2
Tissue
肝臟
Synonyms
BNL-CL.2, BNL CL2, BNL.CL2, BN-CL2, BNCL-2, BNCL2

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BNL CL.2

Cell line · Product number 305177

BNL CL.2, a mouse liver cell line originally derived from BALB/c embryonic liver cells, plays a significant role in the study of cellular biology and mole...

US$550.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

BNL CL.2 是一種源自 BALB/c 胚胎肝細胞的小鼠肝細胞系,在細胞生物學及分子機制研究中扮演著重要角色,特別是在細胞週期及其調控方面。 研究人員廣泛運用 BNL CL.2 來闡明週期蛋白依賴性激酶(CDK)蛋白複合體的特性,並探究這些複合體在化學及病毒轉化後的變化。 該細胞系是多種轉化細胞系(如 BNL 1ME A.7R.1、BNL 1NG A.2 及 BNL SV A.8)的祖先細胞系,這些細胞系均源自 BNL CL.2,且已被證實對於研究轉化後 CDK 的變化至關重要。

BNL CL.2 的特徵在於:於免疫抑制小鼠中測試時不具致瘤性,且無法進行非依附性生長,儘管它確實具備在半固體培養基中形成集落的能力。這使其成為在受控環境中探索細胞過程與轉化現象的無價模型。 相較之下,其衍生物系(例如經 3-甲基膽蒽環氧化物、MNNG 及 SV40 轉化而成的細胞系)則展現出在軟瓊脂中生長以及於免疫缺陷小鼠體內形成腫瘤的能力,凸顯了遺傳與環境變化對細胞行為的影響。 BNL CL.2 細胞系及其衍生物,持續為細胞轉化、穩定細胞轉染,以及細胞與分子生物學相關領域的研究,提供堅實的基礎。

Tissue
肝臟
Synonyms
  • BNL-CL.2
  • BNL CL2
  • BNL.CL2
  • BN-CL2
  • BNCL-2
  • BNCL2

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮性
Tumourigenic
不,這些細胞在免疫抑制小鼠體內並未產生腫瘤,但在半固體培養基中確實形成了集落。

04Identifiers

Citation
BNL CL.2(Cytion 型號 305177)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_4383

05Handling and culture

Culture medium
DMEM,含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉(Cytion 產品編號 820300a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
Fluid renewal
每週 2 至 3 次
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

07Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
胚胎