Cellules HEL-299

HEL-299 est une lignée cellulaire de fibroblastes pulmonaires humains issue d’un individu adulte. Cette lignée cellulaire se distingue notamment par sa capacité limitée à se multiplier en culture; elle entre généralement en sénescence après environ dix passages. Cette caractéristique fait de la lignée HEL-299 un modèle utile pour l’étude du vieillissement cellulaire et de la sénescence, ainsi que de la dynamique de la croissance et de la réplication cellulaires dans des conditions contrôlées.

En plus de ses applications dans la recherche sur le vieillissement, HEL-299 sert également de modèle pour l’étude des voies de transduction du signal. Plus précisément, on a observé que l’expression du récepteur muscarinique M2 dans ces cellules est régulée à la baisse à la suite d’une stimulation par la protéine kinase C. Cette réponse met en évidence l’utilité de la lignée cellulaire dans la recherche pharmacologique et dans l’étude des mécanismes sous-jacents à la signalisation et à la régulation médiées par les récepteurs. La modification de l’expression des récepteurs à la suite de l’activité de la kinase peut fournir des indications sur les réponses cellulaires aux stimuli externes, ce qui pourrait contribuer à l’élaboration de stratégies thérapeutiques ciblant des voies similaires dans diverses maladies.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.