Skip to content
HEL-299 เซลล์
Tissue
ปอด
Synonyms
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Documents

HEL-299 เซลล์

Cell line · Product number 300193

HEL-299 is a human lung fibroblast cell line derived from an adult individual. This cell line is particularly noted for its finite capacity to propagate i...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

HEL-299 เป็นสายพันธุ์เซลล์ไฟโบรบลาสต์ปอดของมนุษย์ที่ได้มาจากบุคคลผู้ใหญ่ สายพันธุ์นี้เป็นที่รู้จักโดยเฉพาะในด้านความสามารถในการแพร่พันธุ์ในวัฒนธรรมที่มีขีดจำกัด โดยทั่วไปจะเข้าสู่ภาวะชราภาพหลังจากผ่านการเพาะเลี้ยงประมาณสิบครั้ง ลักษณะนี้ทำให้ HEL-299 เป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาการแก่ของเซลล์และภาวะชราภาพ รวมถึงพลวัตของการเจริญเติบโตและการจำลองเซลล์ภายใต้สภาวะที่ควบคุมได้

นอกเหนือจากการประยุกต์ใช้ในการวิจัยด้านความชราแล้ว HEL-299 ยังทำหน้าที่เป็นแบบจำลองสำหรับการศึกษาเส้นทางส่งสัญญาณอีกด้วย โดยเฉพาะอย่างยิ่ง มีการสังเกตว่าการแสดงออกของตัวรับ M2 muscarinic ในเซลล์เหล่านี้ลดลงหลังจากการกระตุ้นด้วยโปรตีนไคเนส ซี การตอบสนองนี้เน้นถึงประโยชน์ของสายเซลล์นี้ในการวิจัยทางเภสัชวิทยาและการสืบสวนกลไกที่อยู่เบื้องหลังการส่งสัญญาณและการควบคุมที่เกิดจากตัวรับการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของตัวรับหลังจากการทำงานของเอนไซม์ไคเนสสามารถให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการตอบสนองของเซลล์ต่อสิ่งกระตุ้นภายนอก ซึ่งอาจช่วยในการพัฒนากลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่เส้นทางที่คล้ายกันในโรคต่างๆ

Tissue
ปอด
Synonyms
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Karyotype
มนุษย์เพศชายปกติ, มีโครโมโซมสองชุด, มีเสถียรภาพ

04Identifiers

Citation
HEL-299 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300193)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ตัวรับมัสคารินิก M2
Protein expression
P53 เป็นลบ
Isoenzymes
จี6พีดี, เอ
Virus susceptibility
โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา), โปลิโอไวรัส 1
Reverse transcriptase
เชิงลบ

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, bFGF 1 นาโนกรัม/มิลลิลิตร
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์
Ethnicity
แอฟริกัน