Skip to content
תאי HEL-299
Tissue
ריאה
Synonyms
HEL 299, Hel-299, Hel 299, HEL299

Documents

תאי HEL-299

Cell line · Product number 300193

HEL-299 is a human lung fibroblast cell line derived from an adult individual. This cell line is particularly noted for its finite capacity to propagate i...

US$395.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

HEL-299 הוא קו תאים של פיברובלסטים בריאות אנושיות שמקורו באדם בוגר. קו תאים זה ידוע במיוחד ביכולתו המוגבלת להתרבות בתרבית, ובדרך כלל נכנס לתהליך הזדקנות לאחר כעשרה מעברים. מאפיין זה הופך את HEL-299 למודל שימושי לחקר הזדקנות תאים והזדקנות, כמו גם לדינמיקה של צמיחת תאים ושכפולם בתנאים מבוקרים.

בנוסף ליישומים במחקר הזדקנות, HEL-299 משמש גם כמודל לחקר מסלולי העברת אותות. באופן ספציפי, נצפה כי הביטוי של קולטן M2 מוסקריני בתאים אלה מופחת לאחר גירוי עם חלבון קינאז C. תגובה זו מדגישה את השימושיות של קו התאים במחקר פרמקולוגי ובחקר המנגנונים העומדים בבסיס איתות וויסות מתווכים על ידי קולטנים. השינוי בביטוי הקולטן בעקבות פעילות הקינאז יכול לספק תובנות לגבי תגובות תאיות לגירויים חיצוניים, ובכך לסייע בפיתוח אסטרטגיות טיפוליות המכוונות למסלולים דומים במחלות שונות.

Tissue
ריאה
Synonyms
  • HEL 299
  • Hel-299
  • Hel 299
  • HEL299

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Karyotype
גבר אנושי רגיל, דיפלואידי, יציב

04Identifiers

Citation
HEL-299 (מספר קטלוגי Cytion 300193)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2480

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
קולטן מוסקריני M2
Protein expression
P53 שלילי
Isoenzymes
G6PD, A
Virus susceptibility
סטומטיטיס שלפוחיתית (אינדיאנה), נגיף פוליו 1
Reverse transcriptase
שלילי

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS, 1 ng/mL bFGF
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
עובר
Ethnicity
אפריקאי