Cellules HK/FDC

Des lignées cellulaires de type cellules dendritiques folliculaires (FDC) (cellules HK) issues d’amygdales humaines ont été établies afin d’étudier le rôle des FDC dans les centres germinatifs des follicules lymphoïdes. Au départ, les cellules HK exprimaient des marqueurs tels que CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 et HJ2, mais elles ont perdu l’expression de DRC-1, CD21 et CD23 au bout de trois jours de culture. Sur le plan morphologique et fonctionnel, les cellules HK se distinguent des fibroblastes et présentent des besoins de croissance qui leur sont propres. Elles se lient aux cellules B, favorisant ainsi leur prolifération, mais non aux cellules T. Les cellules T activées, stimulées par des anticorps anti-CD3, se lient aux cellules HK, induisant des changements phénotypiques et favorisant leur croissance.

Les cellules HK se lient de préférence aux lymphocytes B des centres germinatifs (CG) et les stimulent, les sauvant ainsi de l’apoptose. Elles favorisent la prolifération des lymphocytes B en présence d’anticorps anti-mu ou anti-CD40. Ces cellules produisent également des facteurs solubles qui contribuent à leur activité co-stimulatrice. Des analyses phénotypiques et fonctionnelles suggèrent que les cellules HK pourraient provenir des cellules FDC, ce qui met en évidence leur rôle potentiel dans le soutien de la maturation et de la différenciation des lymphocytes B des centres germinatifs.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.