Skip to content
เซลล์ HK/FDC
Tissue
ช่องปาก, ต่อมทอนซิล
Disease
เซลล์เดนไดรติกฟอลลิคูลาร์ชนิดไม่ใช่มะเร็ง
Synonyms
FDC/HK

Documents

เซลล์ HK/FDC

Cell line · Product number 300204

Immortalized versions of these HK/FDC-like cells are now also ava...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description
เซลล์ที่มีลักษณะคล้าย HK/FDC ซึ่งถูกทำให้คงอยู่ตลอดกาลมีให้บริการแล้วเช่นกัน ซึ่งมอบเครื่องมือที่เสถียรและสามารถปรับขนาดได้มากขึ้นสำหรับการศึกษาในระยะยาวเกี่ยวกับหน้าที่ของ FDC และการโต้ตอบของเซลล์ B

เซลล์ไลน์ชนิดคล้ายเซลล์เดนไดรติกฟอลลิคูลาร์ (FDC-like cell lines) (เซลล์ HK) จากต่อมทอนซิลมนุษย์ถูกสร้างขึ้นเพื่อศึกษาบทบาทของเซลล์ FDC ในศูนย์กำเนิดของฟอลลิคูลาร์ลิมโฟอิด ในตอนแรก เซลล์ HK แสดงตัวบ่งชี้เช่น CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 และ HJ2 แต่สูญเสีย DRC-1, CD21 และ CD23 ภายในสามวันของการเพาะเลี้ยง ในเชิงสัณฐานวิทยาและหน้าที่ เซลล์ HK มีความแตกต่างจากไฟโบรบลาสต์และมีข้อกำหนดในการเจริญเติบโตที่เป็นเอกลักษณ์ พวกมันจับกับเซลล์ B เพื่อสนับสนุนการเพิ่มจำนวนของเซลล์ B แต่ไม่จับกับเซลล์ T เซลล์ T ที่ถูกกระตุ้นด้วยแอนติบอดีต่อต้าน CD3 จะจับกับเซลล์ HK ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางฟีโนไทป์และส่งเสริมการเจริญเติบโตของพวกมัน

เซลล์ HK จะจับและกระตุ้นเซลล์ B ในศูนย์กำเนิดภูมิคุ้มกัน (GC) อย่างมีลักษณะเฉพาะ ช่วยปกป้องเซลล์เหล่านี้จากการตายแบบอะพอพโทซิส พวกมันเพิ่มการแบ่งตัวของเซลล์ B เมื่อมีแอนติบอดีต่อต้าน mu หรือต่อต้าน CD40 เซลล์เหล่านี้ยังผลิตปัจจัยที่ละลายได้ซึ่งมีส่วนช่วยในกิจกรรมการกระตุ้นร่วมของพวกมัน การวิเคราะห์ลักษณะทางฟีโนไทป์และการทำงานชี้ให้เห็นว่าเซลล์ HK อาจมีต้นกำเนิดจาก FDCs ซึ่งเน้นย้ำถึงบทบาทที่เป็นไปได้ของพวกมันในการสนับสนุนการเจริญเติบโตและการแยกตัวของเซลล์ B ในศูนย์กำเนิดภูมิคุ้มกัน

Tissue
ช่องปาก, ต่อมทอนซิล
Disease
เซลล์เดนไดรติกฟอลลิคูลาร์ชนิดไม่ใช่มะเร็ง
Applications
เซลล์ฟีดเดอร์สำหรับการเจริญเติบโตของลิมโฟไซต์ชนิดบีปกติและลิมโฟมา/ลูคีเมีย การศึกษาการพัฒนาของเซลล์บีในศูนย์กำเนิดของต่อมน้ำเหลือง อาจมีการวิจัยเกี่ยวกับการติดเชื้อไวรัสใน FDCs
Synonyms
  • FDC/HK

02Classification

Organism
Human
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
มีลักษณะเป็นก้อนเนื้อ
Cell type
เซลล์เดนไดรติกฟอลลิคูลาร์
Doubling time
ประมาณ 24-36 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HK/FDC (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300204)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Expression and susceptibility

Surface antigens
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
1 ถึง 3 x 104 เซลล์/เซนติเมตร²
Fluid renewal
1 ถึง 2 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
เด็ก
Ethnicity
คอเคเชียน