Skip to content
תאי HK/FDC
Tissue
חלל הפה, שקדים
Disease
קו תאים דנדריטיים פוליקולריים שאינם ממאירים
Synonyms
FDC/HK

Documents

תאי HK/FDC

Cell line · Product number 300204

Immortalized versions of these HK/FDC-like cells are now also ava...

US$800.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description
גרסאות מונצחות של תאים אלה, הדומים לתאי HK/FDC, זמינות כעת גם הן, ומציעות כלי יציב וניתן להרחבה יותר למחקרים ארוכי טווח על תפקוד ה-FDC ועל האינטראקציות בין תאי B.

קווי תאים דמויי תאי דנדריטים פוליקולריים (FDC) (תאי HK) משקדים אנושיים הוקמו כדי לחקור את תפקידם של תאי FDC במרכזים ג'רמינליים של זקיקי לימפה. בתחילה, תאי HK ביטאו סמנים כמו CD21, CD23, DRC-1, CD40, VCAM-1, ICAM-1 ו-HJ2, אך איבדו את DRC-1, CD21 ו-CD23 תוך שלושה ימים מתרבית. מבחינה מורפולוגית ותפקודית, תאי HK נבדלים מפיברובלסטים ויש להם דרישות גדילה ייחודיות. הם נקשרים לתאי B, תומכים בהתפשטותם, אך לא לתאי T. תאי T מופעלים, המגורים על ידי נוגדנים אנטי-CD3, נקשרים לתאי HK, גורמים לשינויים פנוטיפיים ומקדמים את גדילתם.

תאי HK נקשרים ומעודדים באופן מועדף תאי B במרכז הגרמינלי (GC), ומצילים אותם מאפופטוזיס. הם מגבירים את התרבות תאי B בנוכחות אנטי-מו או אנטי-CD40. תאים אלה מייצרים גם גורמים מסיסים התורמים לפעילותם הקוסטמולטורית. ניתוחים פנוטיפיים ותפקודיים מצביעים על כך שתאי HK עשויים להיות נגזרים מתאי FDC, מה שמדגיש את תפקידם הפוטנציאלי בתמיכה בהתבגרות ובהתמיינות תאי B ב-GC.

Tissue
חלל הפה, שקדים
Disease
קו תאים דנדריטיים פוליקולריים שאינם ממאירים
Applications
תא מזין לצמיחת לימפוציטים B נורמליים ולימפומות/לוקמיות. מחקרים על התפתחות תאי B במרכזים ג'רמינליים של בלוטות לימפה. ייתכן שמחקר על זיהום נגיפי של FDCs
Synonyms
  • FDC/HK

02Classification

Organism
Human
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype immortalized cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
שרירני
Cell type
תא דנדריטי פוליקולרי
Doubling time
כ-24–36 שעות

04Identifiers

Citation
HK/FDC (מספר קטלוגי Cytion 300204)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_IY38

05Expression and susceptibility

Surface antigens
CD14+, CD40+, ICAM-1+, VCAM-1+

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1 עד 3 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
1 עד 2 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
ילד
Ethnicity
קווקזי