KB

La lignée cellulaire KB est une lignée de cellules épithéliales adhérentes que l’on croyait initialement provenir d’un carcinome épidermique de la bouche. Cependant, des analyses ultérieures, notamment des dosages d’isoenzymes, l’identification du chromosome marqueur HeLa et l’empreinte génétique, ont révélé que la lignée cellulaire KB avait en réalité été établie à la suite d’une contamination par des cellules HeLa. Cette erreur d’identification souligne l’importance d’une authentification rigoureuse des lignées cellulaires dans le domaine de la recherche.

Les cellules KB expriment la kératine, une protéine structurelle clé des cellules épithéliales, comme l’a confirmé la coloration à l’immunoperoxydase. De plus, on a découvert qu’elles contiennent des séquences du virus du papillome humain de type 18 (VPH-18), ce qui pourrait présenter un intérêt pour les études liées à l’oncologie virale. Le profil isoenzymatique des cellules KB comprend la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PD) de type A, ce qui correspond aux caractéristiques des cellules HeLa. Compte tenu de ces résultats, il est essentiel de reconnaître que les cellules KB partagent de nombreuses propriétés biologiques avec les cellules HeLa, y compris la présence de chromosomes marqueurs spécifiques aux cellules HeLa.

Par conséquent, les cellules KB doivent être utilisées avec prudence, en particulier dans les expériences où l’origine cellulaire exacte est cruciale. Malgré cela, elles demeurent un modèle utile pour l’étude du comportement des cellules épithéliales, de la biologie du cancer et des mécanismes d’intégration et d’expression virales. Comme toutes les lignées cellulaires, les cellules KB sont strictement destinées à la recherche in vitro et ne conviennent pas à des applications thérapeutiques ou in vivo.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.