KB

Dòng tế bào KB là một dòng tế bào biểu mô bám dính ban đầu được cho là có nguồn gốc từ một khối u biểu mô của miệng. Tuy nhiên, các phân tích sau đó, bao gồm thử nghiệm isoenzyme, xác định nhiễm sắc thể dấu hiệu HeLa và phân tích vân tay DNA, đã cho thấy rằng dòng tế bào KB thực chất được thiết lập do nhiễm bẩn với tế bào HeLa. Sự nhầm lẫn này nhấn mạnh tầm quan trọng của việc xác thực nghiêm ngặt dòng tế bào trong nghiên cứu.

Tế bào KB biểu hiện keratin, một protein cấu trúc chính trong tế bào biểu mô, như đã được xác nhận bằng phương pháp nhuộm immunoperoxidase. Ngoài ra, chúng được phát hiện chứa các trình tự từ virus papilloma người 18 (HPV-18), có thể có ý nghĩa trong các nghiên cứu liên quan đến ung thư virus. Hình ảnh isoenzyme của tế bào KB bao gồm glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) loại A, phù hợp với đặc điểm của tế bào HeLa. Dựa trên các phát hiện này, điều quan trọng là phải nhận thức rằng tế bào KB chia sẻ nhiều đặc tính sinh học với tế bào HeLa, bao gồm sự hiện diện của các nhiễm sắc thể dấu hiệu đặc trưng của HeLa.

Do đó, tế bào KB nên được sử dụng thận trọng, đặc biệt trong các thí nghiệm mà nguồn gốc tế bào chính xác là yếu tố quan trọng. Mặc dù vậy, chúng vẫn là mô hình hữu ích để nghiên cứu hành vi của tế bào biểu mô, sinh học ung thư và cơ chế tích hợp và biểu hiện của virus. Giống như tất cả các dòng tế bào, tế bào KB chỉ được sử dụng cho nghiên cứu in vitro và không phù hợp cho các ứng dụng điều trị hoặc in vivo.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.