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KB
Cell line · Product number 300446
The KB cell line is an adherent epithelial cell line initially believed to be derived from an epidermal carcinoma of the mouth. However, subsequent analys...
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01General information
- Description
KB 细胞系是一种粘附性上皮细胞系，最初被认为是从口腔表皮癌中提取的。然而，随后的分析（包括同工酶测定、HeLa 标记染色体鉴定和 DNA 指纹鉴定）显示，KB 细胞系实际上是通过污染 HeLa 细胞而建立的。这一错误鉴定强调了在研究中对细胞系进行严格鉴定的重要性。
经免疫过氧化物酶染色证实，KB 细胞表达角蛋白，这是上皮细胞的一种关键结构蛋白。此外，还发现它们含有人类乳头瘤病毒 18（HPV-18）的序列，这可能是病毒肿瘤学相关研究的兴趣所在。KB 细胞的同工酶谱包括葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）A 型，这与 HeLa 细胞的特征一致。鉴于这些发现，必须认识到 KB 细胞与 HeLa 细胞有许多共同的生物特性，包括存在 HeLa 特异性标记染色体。
因此，KB 细胞应谨慎使用，尤其是在对确切的细胞来源至关重要的实验中。尽管如此，KB 细胞仍然是研究上皮细胞行为、癌症生物学以及病毒整合和表达机制的有用模型。与所有细胞系一样，KB 细胞仅用于体外研究，不适用于治疗或体内应用。
- Tissue
- 宫颈内口
- Disease
- 腺癌
- Synonyms
- Strain KB
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Cell type
- 表皮
- Karyotype
- 2n = 46
04Identifiers
- Citation
- KB（Cytion 目录号 300446）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0372
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- G6PD，A 型
- Virus susceptibility
- 脊髓灰质炎病毒 1、腺病毒 3
- Products
- 角蛋白
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），w：2 mM L-谷氨酰胺，w：2.2 g/L NaHCO3，w：EBSS（Cytion 文章编号 820100a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
- Seeding density
- 2×10⁴个细胞/cm²将在2至3天内形成融合单层。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解冻后，将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 30年
- Ethnicity
- 非洲裔美国人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes