KHM-5M

La lignée cellulaire KHM-5M est un modèle important dérivé d’un patient atteint d’un carcinome thyroïdien indifférencié compliqué d’une neutrophilie et d’une pleurésie maligne. Cette lignée cellulaire se caractérise par une production importante de facteurs chimiotactiques des neutrophiles, notamment l’interleukine-8 humaine (IL-8) et le facteur de stimulation des colonies de granulocytes et de macrophages (GM-CSF). Ces facteurs sont essentiels au recrutement et à l’activation des neutrophiles, qui jouent un rôle central dans la réponse immunitaire et l’inflammation. Il a été démontré que les cellules KHM-5M possèdent une activité chimiotactique extrême, une caractéristique qui a été confirmée par des expériences in vitro utilisant des milieux conditionnés provenant de ces cellules et la technique modifiée de la chambre de Boyden.

De plus, des cellules KHM-5M ont été transplantées chez des rats nus, chez lesquels une infiltration de neutrophiles a été observée dans et autour du tissu tumoral transplanté. Cette découverte souligne la pertinence de la lignée KHM-5M en tant que modèle pour l’étude des interactions entre les cellules tumorales et le microenvironnement immunitaire, en particulier en ce qui concerne le recrutement et la fonction des neutrophiles. Cette lignée cellulaire constitue également un outil précieux pour étudier les mécanismes moléculaires sous-jacents à la production de cytokines dans le cancer et la modification subséquente des caractéristiques pathologiques. Grâce à des techniques de clonage de l’ADN, les activités chimiotactiques attribuées à l’IL-8 et au GM-CSF ont été confirmées, ce qui confirme la ligne cellulaire KHM-5M comme une ressource importante pour la recherche sur les interactions entre la tumeur et le système immunitaire induites par les cytokines.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.