Skip to content
KHM-5M
Tissue
בלוטת התריס
Disease
קרצינומה אנאפלסטית של בלוטת התריס
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
KHM/5M, KHM5M

Documents

KHM-5M

Cell line · Product number 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים KHM-5M הוא מודל חשוב שמקורו בחולה עם קרצינומה בלתי מובחנת של בלוטת התריס, המלווה בנויטרופיליה ובדלקת קרום ריאה ממאירה. קו תאים זה מאופיין בייצור משמעותי של גורמים כימוטקטיים לנויטרופילים, ובפרט אינטרלוקין 8 אנושי (IL-8) וגורם מגרה מושבות גרנולוציטים-מקרופאגים (GM-CSF). גורמים אלה חיוניים לגיוס ולהפעלה של נויטרופילים, הממלאים תפקיד מרכזי בתגובה החיסונית ובדלקת. תאי KHM-5M הוכחו כבעלי פעילות כימוטקטית קיצונית, תכונה שאושרה בניסויים במבחנה באמצעות מדיה מותאמת מהתאים וטכניקת תא בוידן המותאמת.

בנוסף, תאי KHM-5M הושתלו בעכברים עירומים, שם נצפתה חדירה של נויטרופילים בתוך רקמת הגידול המושתלת ובסביבתה. ממצא זה מדגיש את הרלוונטיות של KHM-5M כמודל לחקר האינטראקציות בין תאי הגידול לסביבה החיסונית, במיוחד בהקשר לגיוס ותפקוד הנויטרופילים. קו התאים משמש גם ככלי חשוב לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס ייצור ציטוקינים בסרטן והשינוי הבא של המאפיינים הפתולוגיים. באמצעות טכניקות שיבוט DNA, אושרו הפעילויות הכימוטקטיות המיוחסות ל-IL-8 ו-GM-CSF, מה שמחזק את קו התאים KHM-5M כמשאב משמעותי למחקר על אינטראקציות בין הגידול למערכת החיסון המונעות על ידי ציטוקינים.

Tissue
בלוטת התריס
Disease
קרצינומה אנאפלסטית של בלוטת התריס
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
פיברובלסט
Doubling time
27 שעות

04Identifiers

Citation
KHM-5M (מספר קטלוג Cytion 305148)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Donor age
65 שנים