Skip to content
KHM-5M
Tissue
Tuyến giáp
Disease
Ung thư biểu mô không biệt hóa của tuyến giáp
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
KHM/5M, KHM5M

Documents

KHM-5M

Cell line · Product number 305148

The KHM-5M cell line is an important model derived from a patient with undifferentiated thyroid carcinoma complicated by neutrophilia and malignant pleuri...

€650.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào KHM-5M là một mô hình quan trọng được phân lập từ bệnh nhân mắc ung thư tuyến giáp không biệt hóa kèm theo tăng bạch cầu trung tính và viêm màng phổi ác tính. Dòng tế bào này đặc trưng bởi khả năng sản xuất đáng kể các yếu tố hóa hướng bạch cầu trung tính, cụ thể là interleukin 8 (IL-8) và yếu tố kích thích tạo dòng bạch cầu hạt-đại thực bào (GM-CSF) của người. Các yếu tố này đóng vai trò quan trọng trong việc thu hút và kích hoạt bạch cầu trung tính, vốn có vai trò then chốt trong phản ứng miễn dịch và viêm nhiễm. Các tế bào KHM-5M được chứng minh là có hoạt tính hóa học cực mạnh, đặc điểm này được xác nhận thông qua các thí nghiệm in vitro sử dụng dịch nuôi cấy từ tế bào và kỹ thuật buồng Boyden đã được sửa đổi.

Ngoài ra, các tế bào KHM-5M được cấy ghép vào chuột nude, nơi quan sát thấy sự xâm nhập của bạch cầu trung tính trong và xung quanh mô khối u cấy ghép. Kết quả này nhấn mạnh tầm quan trọng của KHM-5M như một mô hình để nghiên cứu tương tác giữa tế bào khối u và vi môi trường miễn dịch, đặc biệt liên quan đến quá trình thu hút và chức năng của bạch cầu trung tính. Dòng tế bào này cũng là công cụ quý giá để nghiên cứu các cơ chế phân tử điều khiển sản xuất cytokine trong ung thư và sự thay đổi các đặc điểm bệnh lý sau đó. Thông qua kỹ thuật cloning DNA, hoạt tính hóa hướng được quy cho IL-8 và GM-CSF đã được xác nhận, củng cố vị trí của dòng tế bào KHM-5M như một nguồn tài nguyên quan trọng cho nghiên cứu về tương tác khối u-miễn dịch do cytokine điều khiển.

Tissue
Tuyến giáp
Disease
Ung thư biểu mô không biệt hóa của tuyến giáp
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
  • KHM/5M
  • KHM5M

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào sợi
Doubling time
27 giờ

04Identifiers

Citation
KHM-5M (mã sản phẩm Cytion 305148)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2975

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
65 năm