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KHOS-312H
Tissue
Os
Disease
Ostéosarcome
Synonyms
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

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KHOS-312H

Cell line · Product number 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

La lignée cellulaire KHOS-312H est une lignée cellulaire d’ostéosarcome humain dérivée d’un cancer des os. Cette lignée cellulaire fait partie d’un groupe de modèles d’ostéosarcome dérivés de la lignée KHOS, qui comprend notamment les lignées KHOSNP et KHOS-240S. À l’instar d’autres lignées cellulaires d’ostéosarcome, la lignée KHOS-312H est largement utilisée dans la recherche sur le cancer pour étudier la biologie des ostéosarcomes, en particulier leurs caractéristiques génétiques et moléculaires, ainsi que pour évaluer des agents thérapeutiques potentiels. La lignée cellulaire KHOS-312H est connue pour sa résistance à certains inhibiteurs de kinases ciblés, tels que ceux agissant sur la voie PI3K-Akt-mTOR, ce qui en fait un modèle essentiel pour l’étude des mécanismes de résistance aux médicaments dans l’ostéosarcome.

L’une des caractéristiques importantes de la lignée cellulaire KHOS-312H réside dans son utilité pour le criblage à haut débit de médicaments anticancéreux. Dans le cadre d’études de criblage à grande échelle, la lignée KHOS-312H a été testée face à un large éventail de composés, comprenant à la fois des médicaments approuvés par la FDA et des agents expérimentaux. Ces études ont révélé que la lignée KHOS-312H présente des degrés variables de sensibilité et de résistance à différentes classes de médicaments anticancéreux, ce qui aide les chercheurs à cartographier le profil moléculaire de la réponse de l’ostéosarcome au traitement. Il convient notamment de souligner la résistance de cette lignée cellulaire aux inhibiteurs de mTOR, ce qui suggère un besoin potentiel de thérapies combinées ou de nouveaux agents pour surmonter ce défi.

Tissue
Os
Disease
Ostéosarcome
Synonyms
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type fibroblaste
Tumourigenic
Non

04Identifiers

Citation
KHOS-312H (numéro de catalogue Cytion 300447)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), contenant : 2 mM de L-glutamine, 2,2 g/L de NaHCO₃, et EBSS (référence Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter au milieu 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
1 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donor

Donor age
13 ans
Ethnicity
caucasien