Skip to content
KHOS-312H
Tissue
Xương
Disease
U xương
Synonyms
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Documents

KHOS-312H

Cell line · Product number 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

KHOS-312H là dòng tế bào ung thư xương người được phân lập từ ung thư xương. Dòng tế bào này thuộc nhóm các mô hình ung thư xương KHOS, bao gồm KHOSNP và KHOS-240S, cùng các dòng khác. Giống như các dòng tế bào u xương khác, KHOS-312H được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư để nghiên cứu sinh học của u xương, đặc biệt là các đặc điểm di truyền và phân tử của chúng, cũng như để đánh giá các tác nhân điều trị tiềm năng. Dòng tế bào KHOS-312H nổi tiếng với khả năng kháng lại một số chất ức chế kinase đích, chẳng hạn như những chất ảnh hưởng đến con đường PI3K-Akt-mTOR, khiến nó trở thành mô hình quan trọng để nghiên cứu cơ chế kháng thuốc trong u xương.

Một trong những đặc điểm quan trọng của dòng tế bào KHOS-312H là khả năng sử dụng trong sàng lọc quy mô lớn các thuốc chống ung thư. Trong các nghiên cứu sàng lọc quy mô lớn, KHOS-312H đã được thử nghiệm với một loạt các hợp chất, bao gồm cả các thuốc đã được FDA phê duyệt và các tác nhân đang được nghiên cứu. Các nghiên cứu này đã chỉ ra rằng KHOS-312H thể hiện mức độ nhạy cảm và kháng thuốc khác nhau đối với các nhóm thuốc chống ung thư khác nhau, giúp các nhà nghiên cứu vẽ bản đồ cảnh quan phân tử của phản ứng ung thư xương đối với điều trị. Đáng chú ý, sự kháng thuốc của dòng tế bào này đối với các chất ức chế mTOR đã được nhấn mạnh đặc biệt, gợi ý về nhu cầu tiềm năng cho các liệu pháp kết hợp hoặc các tác nhân mới để vượt qua thách thức này.

Tissue
Xương
Disease
U xương
Synonyms
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào giống fibroblast
Tumourigenic
Không

04Identifiers

Citation
KHOS-312H (Số catalog Cytion 300447)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Donor age
13 năm
Ethnicity
Người da trắng