Skip to content
KHOS-312H
Tissue
กระดูก
Disease
มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา
Synonyms
KHOS-321H, KHOS312H, KHOS321H

Documents

KHOS-312H

Cell line · Product number 300447

KHOS-312H is a human osteosarcoma cell line derived from bone cancer. This cell line is part of a group of KHOS-derived osteosarcoma models, which include...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

KHOS-312H เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งกระดูกชนิด osteosarcoma ที่ได้มาจากมะเร็งกระดูก สายพันธุ์เซลล์นี้เป็นส่วนหนึ่งของกลุ่มแบบจำลองมะเร็งกระดูก osteosarcoma ที่ได้มาจาก KHOS ซึ่งรวมถึง KHOSNP และ KHOS-240S เป็นต้นเช่นเดียวกับเซลล์ไลน์ของมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาอื่น ๆ KHOS-312H ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยมะเร็ง เพื่อศึกษาชีววิทยาของออสทีโอซาร์โคมา โดยเฉพาะลักษณะทางพันธุกรรมและระดับโมเลกุล รวมถึงการประเมินประสิทธิภาพของสารออกฤทธิ์ทางยาที่เป็นไปได้ เซลล์ไลน์ KHOS-312H เป็นที่รู้จักในด้านความต้านทานต่อตัวยับยั้งไคเนสเป้าหมายบางชนิด เช่น ยาที่ออกฤทธิ์ต่อเส้นทาง PI3K-Akt-mTOR ซึ่งทำให้เป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาวิถีการดื้อยาของออสทีโอซาร์โคมา

หนึ่งในคุณสมบัติที่สำคัญของเซลล์ไลน์ KHOS-312H คือความสามารถในการใช้ในกระบวนการคัดกรองยาต้านมะเร็งแบบปริมาณสูง (high-throughput screening) ในการศึกษาคัดกรองขนาดใหญ่ KHOS-312H ได้รับการทดสอบกับสารประกอบหลากหลายชนิด รวมถึงยาที่ได้รับการรับรองจาก FDA และยาที่กำลังอยู่ในขั้นตอนการวิจัยการศึกษาเหล่านี้ได้เปิดเผยว่า KHOS-312H แสดงระดับความไวและความต้านทานที่แตกต่างกันต่อกลุ่มยาต้านมะเร็งประเภทต่างๆ ซึ่งช่วยให้นักวิจัยสามารถทำแผนที่ภูมิทัศน์ระดับโมเลกุลของการตอบสนองของมะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมาต่อการรักษาได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ความต้านทานของเซลล์ไลน์ต่อตัวยับยั้ง mTOR ได้รับการเน้นย้ำเป็นพิเศษ ซึ่งบ่งชี้ถึงความจำเป็นที่อาจเกิดขึ้นในการใช้การบำบัดแบบผสมผสานหรือยาชนิดใหม่เพื่อเอาชนะความท้าทายนี้

Tissue
กระดูก
Disease
มะเร็งกระดูกชนิดออสทีโอซาร์โคมา
Synonyms
  • KHOS-321H
  • KHOS312H
  • KHOS321H

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ไม่

04Identifiers

Citation
KHOS-312H (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300447)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2545

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
13 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน