ATDC5

ATDC5 הוא קו תאים כונדרוגניים של עכברים, שמקורו בתאי טרטוקרצינומה של עכברים, והוא נמצא בשימוש נרחב כמודל במבחנה לחקר כונדרוגנזה והתפתחות סחוס. קו תאים זה עובר דיפרנציאציה כונדרוגנית רציפה, המדמה תהליכים in vivo כגון עיבוי תאי, ביטוי של סמנים כונדרוציטיים מוקדמים כגון קולגן מסוג II ואגרקן, ומעבר לתאי סחוס היפרטרופיים, המתאפיינים בביטוי קולגן מסוג X ומינרליזציה של המטריקס. בזכות יכולתו להתרבות ולהתמיין ביעילות, ATDC5 משמש מודל חשוב לחקר מנגנונים מולקולריים הקשורים להתפתחות השלד, במיוחד התאבנות אנדוכונדרלית.

תאי ATDC5 שימשו רבות לחקר השפעתם של גורמי גדילה, הורמונים וגורמי שעתוק שונים על התפתחות הסחוס. לדוגמה, הוכח כי גורם גדילה טרנספורמטיבי-בטא (TGF-β) מקדם התמיינות כונדרוגנית מוקדמת על ידי ויסות הביטוי של רכיבי המטריקס החוץ-תאיים כמו פיברונקטין. באופן דומה, חלבונים מורפוגנטיים של העצם (BMPs), במיוחד BMP-2, -4 ו-7, ממלאים תפקיד קריטי בקידום שלבים שונים של התמיינות כונדרוציטים ב-ATDC5. יתר על כן, הוכח כי הפעלת תעלות TRPV4 (transient receptor potential vanilloid 4) בתאים אלה, בשילוב עם היאלורונאן, משפרת את הביטוי של סמנים כונדרוגניים מרכזיים כגון SOX9 ו-Aggrecan, מה שמחזק עוד יותר את התועלת שלהם במחקרים בתחום הנדסת רקמות סחוס.

קו תאים זה היה חשוב גם במחקר פרוטאומיקה, והראה שתאי ATDC5 יכולים לסנתז רכיבים עיקריים במטריקס החוץ-תאי (ECM) של הסחוס, כגון aggrecan וקולגן מסוג II, יחד עם השינויים הפוסט-תרגומיים הנדרשים לתפקוד הסחוס. יכולתו לשחזר אירועים ביוסינתטיים חיוניים ב-ECM הופכת את ATDC5 למודל חיוני לחקר היווצרות הסחוס ופתולוגיות נלוות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו