ATDC5

ATDC5 เป็นสายเซลล์คอนดโรเจนิคของหนูที่ได้มาจากเซลล์เทอราโตคาร์ซิโนมาของหนู และถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองสำหรับการศึกษาคอนดโรเจเนซิสและการพัฒนาของกระดูกอ่อน สายเซลล์นี้ผ่านกระบวนการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์คอนดรอกไซท์ตามลำดับ ซึ่งเลียนแบบกระบวนการในร่างกาย เช่น การควบแน่นของเซลล์ การแสดงออกของตัวบ่งชี้คอนดรอกไซท์ในระยะแรก เช่น คอลลาเจนชนิดที่ 2 และแอ็กเรแคน และการเปลี่ยนเป็นเซลล์คอนดรอกไซท์ในระยะโตเต็มที่ ซึ่งมีการแสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 10 และการตกตะกอนของแร่ธาตุในเมทริกซ์เนื่องจากความสามารถในการเพิ่มจำนวนและเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์ชนิดต่าง ๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ATDC5 จึงเป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาของกระดูก โดยเฉพาะกระบวนการสร้างกระดูกจากเนื้อเยื่อกระดูกอ่อน (endochondral ossification)

เซลล์ ATDC5 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาอิทธิพลของปัจจัยการเจริญเติบโต ฮอร์โมน และปัจจัยการถอดรหัสต่าง ๆ ต่อกระบวนการสร้างกระดูกอ่อนตัวอย่างเช่น ตัวกระตุ้นการเจริญเติบโตแบบเปลี่ยนแปลง-เบต้า (TGF-β) ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถส่งเสริมการแยกตัวเป็นกระดูกอ่อนในระยะแรกโดยการปรับเปลี่ยนการแสดงออกขององค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ เช่น ไฟโบรเนกติน ในทำนองเดียวกัน โปรตีนบ่มเพาะกระดูก (BMPs) โดยเฉพาะ BMP-2, -4, และ -7 มีบทบาทสำคัญในการส่งเสริมการแยกตัวของเซลล์กระดูกอ่อนในระยะต่างๆ ใน ATDC5นอกจากนี้ การกระตุ้นช่อง TRPV4 (transient receptor potential vanilloid 4) ในเซลล์เหล่านี้ ร่วมกับไฮยาลูโรแนน ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสามารถเพิ่มการแสดงออกของตัวบ่งชี้ chondrogenic ที่สำคัญ เช่น SOX9 และ Aggrecan ซึ่งสนับสนุนประโยชน์ของมันในการศึกษาด้านวิศวกรรมเนื้อเยื่อกระดูกอ่อน

สายเซลล์นี้ยังมีบทบาทสำคัญในการวิจัยโปรตีโอมิกส์ โดยแสดงให้เห็นว่าเซลล์ ATDC5 สามารถสังเคราะห์องค์ประกอบหลักของเมทริกซ์นอกเซลล์ของกระดูกอ่อน (ECM) เช่น แอกเกรคานและคอลลาเจนชนิดที่ 2 พร้อมกับการดัดแปลงหลังการแปลที่เหมาะสมซึ่งจำเป็นต่อการทำงานของกระดูกอ่อน ความสามารถในการจำลองเหตุการณ์สำคัญในการสังเคราะห์ ECM ทำให้ ATDC5 เป็นแบบจำลองที่ขาดไม่ได้สำหรับการศึกษาการก่อตัวของกระดูกอ่อนและพยาธิสภาพที่เกี่ยวข้อง

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.