ATDC5

A ATDC5 é uma linhagem celular condrogênica murina derivada de células de teratocarcinoma de camundongo e é amplamente utilizada como modelo in vitro para o estudo da condrogênese e do desenvolvimento da cartilagem. Essa linhagem celular passa por uma diferenciação condrogênica sequencial, imitando processos in vivo, como a condensação celular, a expressão de marcadores condrocíticos precoces, como o colágeno tipo II e o agrecano, e a transição para condrócitos hipertróficos, marcada pela expressão do colágeno tipo X e pela mineralização da matriz. Devido à sua capacidade de proliferar e se diferenciar de forma eficiente, a ATDC5 serve como um modelo valioso para a exploração de mecanismos moleculares relacionados ao desenvolvimento esquelético, especialmente à ossificação endocondral.

As células ATDC5 têm sido amplamente utilizadas para estudar a influência de vários fatores de crescimento, hormônios e fatores de transcrição na condrogênese. Por exemplo, demonstrou-se que o fator de crescimento transformador beta (TGF-β) promove a diferenciação condrogênica precoce ao modular a expressão de componentes da matriz extracelular, como a fibronectina. Da mesma forma, as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), particularmente as BMP-2, -4 e -7, desempenham um papel fundamental na promoção de diferentes estágios da diferenciação dos condrócitos nas células ATDC5. Além disso, demonstrou-se que a ativação dos canais do receptor potencial transitório vanilóide 4 (TRPV4) nessas células, combinada com hialuronano, aumenta a expressão de marcadores condrogênicos-chave, como SOX9 e agrecano, reforçando ainda mais sua utilidade em estudos de engenharia de tecido cartilaginoso.

Essa linhagem celular também tem sido fundamental na pesquisa proteômica, demonstrando que as células ATDC5 são capazes de sintetizar os principais componentes da matriz extracelular (MEC) da cartilagem, como o agrecano e o colágeno tipo II, juntamente com as modificações pós-traducionais necessárias para o funcionamento da cartilagem. Sua capacidade de reproduzir eventos cruciais da biossíntese da MEC torna a ATDC5 um modelo indispensável para o estudo da formação da cartilagem e de patologias relacionadas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.