Proteja suas culturas contra a contaminação oculta
Os micoplasmas são pequenos organismos procarióticos, pequenos demais para serem visíveis ao microscópio e que não podem ser eliminados pelos antibióticos comuns. Eles podem afetar o crescimento, a proliferação e a morfologia das linhagens celulares, o que pode levar a resultados experimentais pouco confiáveis.
Aproximadamente 15 a 35 % das linhagens celulares contínuas estão contaminadas com micoplasma1,2. Por isso, recomenda-se um controle frequente para garantir um ambiente livre de micoplasma.
Duas opções de teste
A Cytion oferece testes de curto e de longo prazo
Métodos de análise
Ensaio colorimétrico repórter
Este teste é um ensaio colorimétrico baseado em células. Na presença de micoplasma, uma linhagem celular repórter induz uma cascata de sinalização que altera a cor do meio de vermelho para azul. O ensaio é realizado em placas de 96-well e lido em um espectrofotômetro de microplacas a 620 a 655 nm. São detectadas todas as espécies de micoplasma e acholeplasma, bem como outros contaminantes bacterianos em cultura celular.
Amplificação isotérmica
Um teste rápido e confiável baseado na amplificação isotérmica de DNA específico de micoplasma, com detecção em tempo real por meio de um corante intercalante de DNA. Ele detecta as seis espécies mais comuns, responsáveis por mais de 95 % das contaminações: M. orale, M. hyorhinis, M. arginini, M. fermentans, M. hominis e A. laidlawii. Devido à homologia de sequência, também são detectadas outras espécies (M. pneumoniae, M. gallisepticum e M. synoviae). As amostras positivas e negativas são distinguidas pela temperatura de fusão (Tm).
Amostras
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- Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2002;38(2):79–85. doi:10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2
- Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002;39(2):75–90. doi:10.1023/A:1022913015916

