Proteja sus cultivos contra la contaminación oculta
Los micoplasmas son pequeños organismos procariotas, demasiado pequeños para ser visibles al microscopio, que no pueden eliminarse con los antibióticos comunes. Pueden afectar el crecimiento, la proliferación y la morfología de las líneas celulares, lo que puede dar lugar a resultados experimentales poco confiables.
Aproximadamente entre el 15 y el 35 % de las líneas celulares continuas están contaminadas con micoplasma1,2. Por lo tanto, se recomienda un control frecuente para garantizar un entorno libre de micoplasma.
Dos opciones de prueba
Cytion ofrece pruebas tanto a corto como a largo plazo
Métodos de análisis
Ensayo colorimétrico con gen informador
Esta prueba es un ensayo colorimétrico basado en células. En presencia de micoplasma, una línea celular informadora induce una cascada de señalización que cambia el color del medio de rojo a azul. El ensayo se realiza en placas de 96-well y se lee en un espectrofotómetro de microplacas entre 620 y 655 nm. Se detectan todas las especies de micoplasma y acholeplasma, así como otros contaminantes bacterianos presentes en el cultivo celular.
Amplificación isotérmica
Una prueba rápida y confiable basada en la amplificación isotérmica de DNA específico de micoplasma con detección en tiempo real mediante un colorante intercalante del DNA. Detecta las seis especies más comunes, que representan más del 95 % de las contaminaciones: M. orale, M. hyorhinis, M. arginini, M. fermentans, M. hominis y A. laidlawii. Debido a la homología de secuencia, también se detectan otras especies (M. pneumoniae, M. gallisepticum y M. synoviae). Las muestras positivas y negativas se distinguen por la temperatura de fusión (Tm).
Muestras
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- Uphoff CC, Drexler HG. Comparative PCR analysis for detection of mycoplasma infections in continuous cell lines. In Vitro Cell Dev Biol Anim. 2002;38(2):79–85. doi:10.1290/1071-2690(2002)038<0079:CPAFDO>2.0.CO;2
- Drexler HG, Uphoff CC. Mycoplasma contamination of cell cultures: incidence, sources, effects, detection, elimination, prevention. Cytotechnology. 2002;39(2):75–90. doi:10.1023/A:1022913015916

