Skip to content
תאי BT-474
Tissue
שד, בלוטת חלב
Disease
קרצינומה דוקטלית פולשנית
Metastatic site
צינורי
Synonyms
Bt-474, BT474

Documents

תאי BT-474

Cell line · Product number 300131

BT-474 is a human breast cancer cell line, derived from the ductal carcinoma of a 60-year-old female. This cell line is estrogen and progesterone receptor...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

BT-474 הוא קו תאים של סרטן השד האנושי, שמקורו בקרצינומה של הצינורית של אישה בת 60. קו תאים זה הוא חיובי לקולטני אסטרוגן ופרוגסטרון, מה שהופך אותו למודל חשוב לחקר סוגי סרטן השד המגיבים להורמונים. תאי BT-474 מאופיינים גם בביטוי יתר של HER2/neu (קולטן גורם גדילה אפידרמלי אנושי 2), חלבון המוגבר ומשחק תפקיד קריטי בפתוגנזה ובהתקדמות של סוגים אגרסיביים מסוימים של סרטן השד.

קו התאים BT-474 נמצא בשימוש נרחב במחקר אונקולוגי לחקר המנגנונים המולקולריים של התפשטות סרטן השד ולבחינת אסטרטגיות טיפוליות המכוונות לקולטני הורמונים ולמסלול HER2. תאים אלה שימושיים במיוחד לבחינת היעילות של טיפולים המכוונים ל-HER2, כגון טראסטוזומאב (Herceptin), ולחקר מנגנוני העמידות לטיפולים אלה. קו התאים תרם גם להתקדמות בהבנת האופן שבו מניפולציות הורמונליות משפיעות על צמיחת תאי הסרטן והישרדותם, ומספק תובנות לגבי גישות טיפול פוטנציאליות לגידולים התלויים בהורמונים.

Tissue
שד, בלוטת חלב
Disease
קרצינומה דוקטלית פולשנית
Metastatic site
צינורי
Synonyms
  • Bt-474
  • BT474

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים
MSI status
יציב (MSS)
Karyotype
מצב = 55, טווח = 50 עד 112, שינוי דו-מודאלי 58 - 59 ו-100 בקטעים מאוחרים יותר עם 3 כרומוזומים סמנים
Doubling time
60 עד 80 שעות

04Identifiers

Citation
BT-474 (מספר קטלוגי Cytion 300131)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
HER-2/NEU+, ER+, PR+
Isoenzymes
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, תדירות הפנוטיפ: 0.0426
Mutational profile
מוטציה TP53
Virus susceptibility
נגיף סרטן השד בעכברים (RIII-MuMTV)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS, 10 מיקרוגרם/מ"ל אינסולין
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
2 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה כמעט מלוכדת תוך כ-4 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
כמעט 100% תאים משוקמים עם חיוניות של מעל 90%
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
60 שנים
Ethnicity
קווקזי