Skip to content
Tế bào BT-474
Tissue
Vú, tuyến vú
Disease
Ung thư ống dẫn xâm lấn
Metastatic site
Ống dẫn
Synonyms
Bt-474, BT474

Documents

Tế bào BT-474

Cell line · Product number 300131

BT-474 is a human breast cancer cell line, derived from the ductal carcinoma of a 60-year-old female. This cell line is estrogen and progesterone receptor...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

BT-474 là dòng tế bào ung thư vú người, được phân lập từ ung thư ống dẫn sữa của một phụ nữ 60 tuổi. Dòng tế bào này dương tính với thụ thể estrogen và progesterone, khiến nó trở thành mô hình quý giá để nghiên cứu các loại ung thư vú nhạy cảm với hormone. Tế bào BT-474 cũng có đặc điểm là biểu hiện quá mức của HER2/neu (receptor yếu tố tăng trưởng biểu bì người 2), một protein được khuếch đại và đóng vai trò quan trọng trong cơ chế bệnh lý và tiến triển của một số loại ung thư vú ác tính.

Dòng tế bào BT-474 được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu ung thư để nghiên cứu các cơ chế phân tử của sự phát triển ung thư vú và thử nghiệm các chiến lược điều trị nhắm vào thụ thể hormone và con đường HER2. Các tế bào này đặc biệt hữu ích để đánh giá hiệu quả của các liệu pháp nhắm vào HER2, như trastuzumab (Herceptin), và để khám phá các cơ chế kháng thuốc đối với các liệu pháp này. Dòng tế bào này cũng đã góp phần vào việc hiểu rõ hơn về cách thức các can thiệp hormone ảnh hưởng đến sự phát triển và sự sống còn của tế bào ung thư, cung cấp những hiểu biết về các phương pháp điều trị tiềm năng cho các khối u phụ thuộc hormone.

Tissue
Vú, tuyến vú
Disease
Ung thư ống dẫn xâm lấn
Metastatic site
Ống dẫn
Synonyms
  • Bt-474
  • BT474

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude
MSI status
Ổn định (MSS)
Karyotype
Chế độ = 55, khoảng giá trị = 50 đến 112, sự dịch chuyển hai đỉnh tại 58 - 59 và 100 trong các đoạn sau với 3 nhiễm sắc thể đánh dấu
Doubling time
60 đến 80 giờ

04Identifiers

Citation
BT-474 (Số catalog Cytion 300131)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
HER-2/NEU dương tính, ER dương tính, PR dương tính
Isoenzymes
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, Tần suất kiểu hình: 0.0426
Mutational profile
Biến đổi gen TP53
Virus susceptibility
Virus u vú chuột (RIII-MuMTV)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò (FBS) và 10 microgam/mL insulin
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
2 x 10⁴ tế bào/cm² sẽ tạo thành một lớp tế bào gần như phủ kín bề mặt trong khoảng 4 ngày.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Hơn 90% tế bào được phục hồi với độ sống sót trên 90%
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
60 năm
Ethnicity
Người da trắng