Skip to content
เซลล์ BT-474
Tissue
เต้านม, ต่อมน้ำนม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
Metastatic site
ท่อ
Synonyms
Bt-474, BT474

Documents

เซลล์ BT-474

Cell line · Product number 300131

BT-474 is a human breast cancer cell line, derived from the ductal carcinoma of a 60-year-old female. This cell line is estrogen and progesterone receptor...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

BT-474 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านมของมนุษย์ที่ได้มาจากมะเร็งท่อน้ำนมของผู้หญิงอายุ 60 ปี สายพันธุ์เซลล์นี้แสดงผลบวกต่อตัวรับเอสโตรเจนและโปรเจสเตอโรน ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งเต้านมที่ตอบสนองต่อฮอร์โมนเซลล์ BT-474 ยังมีลักษณะเด่นคือการแสดงออกของ HER2/neu (ตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังมนุษย์ 2) ในระดับที่สูงขึ้น ซึ่งเป็นโปรตีนที่ถูกขยายจำนวนและมีบทบาทสำคัญในการเกิดโรคและพัฒนาของมะเร็งเต้านมชนิดรุนแรงบางประเภท

เซลล์ไลน์ BT-474 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านมะเร็งวิทยาเพื่อศึกษาวิถีโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนของมะเร็งเต้านม และเพื่อทดสอบกลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่ตัวรับฮอร์โมนและเส้นทาง HER2 เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการตรวจสอบประสิทธิภาพของการรักษาที่มุ่งเป้า HER2 เช่น ทราสทูซูแมบ (Herceptin) และการศึกษาวิถีการดื้อต่อวิธีการรักษาเหล่านี้สายเซลล์นี้ยังมีส่วนช่วยในการทำความเข้าใจความก้าวหน้าเกี่ยวกับวิธีที่การปรับเปลี่ยนฮอร์โมนส่งผลต่อการเจริญเติบโตและการอยู่รอดของเซลล์มะเร็ง ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับเนื้องอกที่ขึ้นอยู่กับฮอร์โมน

Tissue
เต้านม, ต่อมน้ำนม
Disease
มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
Metastatic site
ท่อ
Synonyms
  • Bt-474
  • BT474

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
MSI status
เสถียร (MSS)
Karyotype
โหมด = 55, ช่วง = 50 ถึง 112, การเปลี่ยนแปลงแบบสองค่า 58 - 59 และ 100 ในตอนหลังพร้อมกับโครโมโซมเครื่องหมาย 3 ตัว
Doubling time
60 ถึง 80 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
BT-474 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300131)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0179

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
HER-2/NEU+ , ER+ , PR+
Isoenzymes
G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.0426
Mutational profile
การกลายพันธุ์ของ TP53
Virus susceptibility
ไวรัสเนื้องอกเต้านมหนู (RIII-MuMTV)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และอินซูลิน 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 x 10^4 เซลล์/cm2 จะให้ผลเป็นชั้นเซลล์ที่รวมตัวกันเกือบเต็มที่ภายในประมาณ 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
เซลล์ฟื้นตัวเกือบ 100% ที่มีความมีชีวิตอยู่ >90%
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
60 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน