.jpg)
- Tissue
- เต้านม, ต่อมน้ำนม
- Disease
- มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
- Metastatic site
- ท่อ
- Synonyms
- Bt-474, BT474
Documents
เซลล์ BT-474
Cell line · Product number 300131
BT-474 is a human breast cancer cell line, derived from the ductal carcinoma of a 60-year-old female. This cell line is estrogen and progesterone receptor...
Customization / Recommendations
- เซลล์ BT-474Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
BT-474 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านมของมนุษย์ที่ได้มาจากมะเร็งท่อน้ำนมของผู้หญิงอายุ 60 ปี สายพันธุ์เซลล์นี้แสดงผลบวกต่อตัวรับเอสโตรเจนและโปรเจสเตอโรน ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งเต้านมที่ตอบสนองต่อฮอร์โมนเซลล์ BT-474 ยังมีลักษณะเด่นคือการแสดงออกของ HER2/neu (ตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังมนุษย์ 2) ในระดับที่สูงขึ้น ซึ่งเป็นโปรตีนที่ถูกขยายจำนวนและมีบทบาทสำคัญในการเกิดโรคและพัฒนาของมะเร็งเต้านมชนิดรุนแรงบางประเภท
เซลล์ไลน์ BT-474 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านมะเร็งวิทยาเพื่อศึกษาวิถีโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนของมะเร็งเต้านม และเพื่อทดสอบกลยุทธ์การรักษาที่มุ่งเป้าไปที่ตัวรับฮอร์โมนและเส้นทาง HER2 เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการตรวจสอบประสิทธิภาพของการรักษาที่มุ่งเป้า HER2 เช่น ทราสทูซูแมบ (Herceptin) และการศึกษาวิถีการดื้อต่อวิธีการรักษาเหล่านี้สายเซลล์นี้ยังมีส่วนช่วยในการทำความเข้าใจความก้าวหน้าเกี่ยวกับวิธีที่การปรับเปลี่ยนฮอร์โมนส่งผลต่อการเจริญเติบโตและการอยู่รอดของเซลล์มะเร็ง ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับแนวทางการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับเนื้องอกที่ขึ้นอยู่กับฮอร์โมน
- Tissue
- เต้านม, ต่อมน้ำนม
- Disease
- มะเร็งเต้านมชนิดลุกลามแบบท่อ
- Metastatic site
- ท่อ
- Synonyms
- Bt-474
- BT474
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
- MSI status
- เสถียร (MSS)
- Karyotype
- โหมด = 55, ช่วง = 50 ถึง 112, การเปลี่ยนแปลงแบบสองค่า 58 - 59 และ 100 ในตอนหลังพร้อมกับโครโมโซมเครื่องหมาย 3 ตัว
- Doubling time
- 60 ถึง 80 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- BT-474 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300131)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0179
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- HER-2/NEU+ , ER+ , PR+
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1, ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.0426
- Mutational profile
- การกลายพันธุ์ของ TP53
- Virus susceptibility
- ไวรัสเนื้องอกเต้านมหนู (RIII-MuMTV)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และอินซูลิน 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 2 x 10^4 เซลล์/cm2 จะให้ผลเป็นชั้นเซลล์ที่รวมตัวกันเกือบเต็มที่ภายในประมาณ 4 วัน
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- เซลล์ฟื้นตัวเกือบ 100% ที่มีความมีชีวิตอยู่ >90%
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 60 ปี
- Ethnicity
- คอเคเชียน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes