Skip to content
CHO-B7H3
Tissue
שחלה
Disease
שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של B7H3 (CD276)

Documents

CHO-B7H3

Cell line · Product number 305417

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$2,200.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

הצהרת הבהרה: המחירים המוצגים עבור קווי תאים מיועדים אך ורק ללקוחות אקדמיים או ללא כוונת רווח. עבור גופים מסחריים, המחיר הוא כ-6,250 אירו.
אם אתם מייצגים גוף מסחרי או שאינכם בטוחים לאיזו קטגוריה אתם משתייכים, אנא צרו איתנו קשר.


קו התאים CHO-B7H3 הוא קו תאים CHO (שחלות אוגר סיני) רקומביננטי יציב, שהונדס כדי לבטא את הקולטן B7-H3 ברמה גבוהה, כ-430,000 מולקולות לכל תא. קו תאים זה פותח באמצעות טכנולוגיית "מנחתת" (landing pad) חדשנית, המבטיחה שילוב מדויק וניתן לשחזור של הגן B7-H3 במיקום גנומי ספציפי, שאומת מראש. B7-H3, הידוע גם כ-CD276, הוא בן למשפחת B7 של חלבוני נקודות בקרה חיסוניות, והוא מבוטא ביתר בסוגים שונים של סרטן. הוא ממלא תפקיד קריטי בהימנעות חיסונית של תאי הגידול, והוא קשור לפרוגנוזה גרועה בחולי סרטן. עובדה זו הופכת את B7-H3 למטרה מבטיחה לאימונותרפיה לסרטן, במיוחד בפיתוח מעכבי נקודות בקרה ותרכובות נוגדן-תרופה.

הביטוי של B7-H3 בקו תאים זה אושר באמצעות ציטומטריית זרימה עם נוגדן ספציפי למטרה, מה שמבטיח צפיפות קולטנים אמינה ועקבית בכל אוכלוסיית התאים.

Tissue
שחלה
Disease
שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של B7H3 (CD276)
Applications
בדיקת נוגדנים; בדיקות ADCC/CDC; פיתוח טיפול המכוון ל-B7H3; ציטומטריית זרימה; גילוי תרופות

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO line contains a human B7-H3 expression construct for immune receptor studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
כ-14–16 שעות

04Identifiers

Citation
CHO-B7H3 (מספר קטלוגי Cytion 305417)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8V5

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
B7H3 (CD276)

06Handling and culture

Culture medium

לתרבויות דבקות: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)

לתרבויות בתמיסה: CHO Growth Medium A (מ-InSCREENeX; מספר קטלוגי InSCREENeX INS-ME-1039)

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
לתרבויות דבקות: הוסף לתמיסה 5% FBS. הוסף Geneticin (G418-Sulfat) כדי להגיע לריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל.
Dissociation reagent
לתרבויות דבקות: טריפסין-EDTA
Subculturing
לגידול תאים נצמדים שגרתי: שאבו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS כדי להסיר את כל שאריות המדיום. לאחר שאיבת ה-PBS, הוסף את הנפח המתאים של תמיסת טריפסין/EDTA בהתאם לגודל כלי התרבית (לדוגמה, 1 מ"ל עבור בקבוק T25, 3 מ"ל עבור בקבוק T75) והדגיר בטמפרטורת החדר או ב-37°C למשך 5-10 דקות, או עד שהתאים יתנתקו. עקבו אחר ההתנתקות תחת מיקרוסקופ, ובמידת הצורך טפחו קלות על הכלי כדי לשחרר את התאים. לאחר ההתנתקות, הוסיפו מצע מלא כדי להשבית את הטריפסין/EDTA, ערבבו קלות את התאים והעבירו חלק מהתאים המושהים לכלי תרבית חדש המכיל מצע טרי. הכניסו את הכלי לאינקובטור המכוון ל-37°C עם 5%CO2, והחליפו את המצע כל 2-3 ימים.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
2 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery

לאחר ההפשרה, חלק את התאים ביחס של 1:2 עד 1:3 בצלוחיות T25 והמתן לפחות 24 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה וידבקו (בתרבויות דבקות).

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
מבוגר