Skip to content
CHO-K1
Tissue
שחלה
Synonyms
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Documents

CHO-K1

Cell line · Product number 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי CHO-K1 הם תת-קו תאים הנגזר מקו התאים CHO, אשר הוקם במקור בתחילת שנות ה-50 משחלה של אוגר סיני. תאי CHO-K1 נמצאים בשימוש נרחב בייצור נוגדנים מונוקלונליים טיפוליים ותרופות ביולוגיות אחרות. השימוש הנרחב בהם בייצור חלבונים ביולוגיים ותרופות ביולוגיות מיוחס לאופיים האוקריוטי, המאפשר קיפול, הרכבה ושינויים פוסט-תרגומיים כגון גליקוזילציה, המשפיעים על היציבות, היעילות והבטיחות של החלבונים המיוצרים.

בתחום ייצור החלבונים הרקומביננטיים, קו התאים CHO-K1 משמש לביטוי מגוון רחב של חלבונים, כולל נוגדנים מונוקלונליים, גורמי גדילה, ציטוקינים ואנזימים. לחלבונים אלה יש יישומים בטיפולים תרפויטיים, בדיקות אבחון ופורמולות חיסונים.

תאי CHO-K1 מציגים קצב גדילה חזק ומסתגלים לתנאי תרבית שונים, כולל תרבית בתמיסה ותרבית דבוקה, מה שהופך אותם ליקרי ערך בתהליכי ייצור ביולוגי בקנה מידה גדול. הם בעלי רמת יציבות גנטית גבוהה ומשמשים לפיתוח קווי תאים יציבים, שכן הם מסוגלים להגביר ולבטא גנים אקסוגניים ביעילות, דבר חיוני לייצור תשואות גבוהות של חלבונים רקומביננטיים.

תאי CHO-K1 של אוגר סיני ניתנים בקלות להחדרה באמצעות מגוון וקטורים לביטוי גנים, מה שמקל על עריכת גנים או השבתתם. גמישות זו מאפשרת לחוקרים להחדיר גנים ספציפיים, להשתיק גנים או אפילו לבצע עריכת גנים ממוקדת באמצעות טכנולוגיות כמו CRISPR-Cas9 בתאי מארח CHO-K1.

לסיכום, תאי האוגר הסיני CHO-K1 ותאי CHO הם מרכזיים במחקר ביוטכנולוגי ובייצור ביו-פרמצבטי, ומספקים פלטפורמה רב-תכליתית לחקר תפקוד גנים וייצור בקנה מידה גדול של חלבונים רקומביננטיים.

Tissue
שחלה
Applications
קו תאים זה הוא הבחירה האופטימלית עבור טוקסיקולוגיה, ביוטכנולוגיה תעשייתית וביו-ייצור.
Synonyms
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Karyotype
התפלגות תדירות הכרומוזומים 50 תאים: 2n = 22. מספר הגזע הוא היפודיפלואידי
Doubling time
22 שעות

04Identifiers

Citation
CHO-K1 (מספר קטלוגי Cytion 603480)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
סטומטיטיס שלפוחיתית (אינדיאנה), נגיף גטה עמידות לנגיפים: נגיף פוליו 2, נגיף מודוק, נגיף באטון ווילו
Reverse transcriptase
שלילי

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, w: 1.0 mM גלוטמין יציב, w: 1.0 mM נתרן פירובט, w: 1.1 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה צפופה תוך כ-6 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
מבוגר