Ga naar de inhoud
CHO-K1
Weefsel
Eierstok
Synoniemen
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Documenten

CHO-K1

Cell line · Productnummer 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

CHO-K1 cellen zijn een sublijn die is afgeleid van de CHO cellijn, die oorspronkelijk in de vroege jaren 1950 is ontwikkeld uit een Chinese hamster eierstok. CHO-K1 cellen worden op grote schaal gebruikt voor de productie van therapeutische monoklonale antilichamen en andere biofarmaceutische producten. Hun uitgebreide gebruik bij de productie van biofarmaceutische eiwitten en vaccins wordt toegeschreven aan hun eukaryotische aard, die een goede vouwing, assemblage en posttranslationele modificaties zoals glycosylering mogelijk maakt, wat de stabiliteit, werkzaamheid en veiligheid van de geproduceerde eiwitten beïnvloedt.

Op het gebied van recombinante eiwitproductie wordt de CHO-K1 cellijn gebruikt om een breed scala aan eiwitten tot expressie te brengen, waaronder monoklonale antilichamen, groeifactoren, cytokinen en enzymen. Deze eiwitten hebben toepassingen in therapeutische behandelingen, diagnostische tests en vaccinformuleringen.

CHO-K1 cellen vertonen een robuuste groeisnelheid en kunnen worden aangepast aan verschillende kweekomstandigheden, waaronder suspensie- en adherente culturen, waardoor ze zeer waardevol zijn voor bioproductieprocessen op grote schaal. Ze hebben een hoge genetische stabiliteit en worden gebruikt voor de ontwikkeling van stabiele cellijnen, omdat ze exogene genen efficiënt kunnen amplificeren en tot expressie kunnen brengen, wat essentieel is voor de productie van hoge opbrengsten recombinante eiwitten.

CHO-K1 chinese hamstercellen kunnen gemakkelijk worden getransfecteerd met een verscheidenheid aan vectoren voor genexpressie, waardoor genbewerking of knockdown mogelijk wordt. Deze flexibiliteit stelt onderzoekers in staat om specifieke genen te introduceren, genen stil te leggen of zelfs gerichte genbewerking uit te voeren met technologieën zoals CRISPR-Cas9 in CHO-K1 gastheercellen.

De conclusie is dat CHO-K1 cellen van de Chinese hamster en CHO-cellen een centrale rol spelen in biotechnologisch onderzoek en biofarmaceutische productie. Ze bieden een veelzijdig platform voor het bestuderen van genfuncties en de grootschalige productie van recombinante eiwitten.

Weefsel
Eierstok
Toepassingen
Deze cellijn is een optimale keuze voor toxicologie, industriële biotechnologie en bioproductie.
Synoniemen
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classificatie

Organisme
Chinese hamster
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Karyotype
Chromosoomfrequentieverdeling 50 cellen: 2n = 22. Stamnummer is hypodiploïd
Verdubbelingstijd
22 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CHO-K1 (Cytion catalogusnummer 603480)
NCBI-belastingnummer
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expressie en vatbaarheid

Gevoeligheid voor virussen
Vesiculaire stomatitis (Indiana), Getah-virus Virusresistentie: poliovirus 2, modoc-virus, Button Willow-virus
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiele Glutamine, w: 1,0 mM natriumpyruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2 zal in ongeveer 6 dagen een confluente laag opleveren.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, de cellen op een plaat aanbrengen met een dichtheid van 5 x 104 cellen/cm2 en de cellen minstens 24 uur laten herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Volwassen