Pereiti prie turinio
CHO-K1
Audinys
Kiaušidės
Sinonimai
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Dokumentai

CHO-K1

Cell line · Prekės numeris 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

CHO-K1 ląstelės yra CHO ląstelių linijos, išvestos iš CHO ląstelių linijos, kuri buvo sukurta XX a. šeštojo dešimtmečio pradžioje iš Kinijos žiurkėnų kiaušidžių, sublinija. CHO-K1 ląstelės plačiai naudojamos gydomųjų monokloninių antikūnų ir kitų biofarmacinių preparatų gamyboje. Plačiai naudojamos biofarmacinių baltymų ir vakcinų gamyboje dėl jų eukariotinės prigimties, leidžiančios tinkamai lankstytis, jungtis ir atlikti potransliacines modifikacijas, pavyzdžiui, glikozilinimą, kuris turi įtakos gaminamų baltymų stabilumui, veiksmingumui ir saugumui.

Gaminant rekombinantinius baltymus, CHO-K1 ląstelių linija naudojama įvairiems baltymams, įskaitant monokloninius antikūnus, augimo faktorius, citokinus ir fermentus, ekspresuoti. Šie baltymai naudojami gydymui, diagnostiniams tyrimams ir vakcinoms gaminti.

CHO-K1 ląstelės pasižymi dideliu augimo greičiu ir yra pritaikomos įvairioms auginimo sąlygoms, įskaitant suspensines ir adherentines kultūras, todėl yra labai vertingos didelio masto bioprodukcijos procesams. Jos pasižymi dideliu genetiniu stabilumu ir yra naudojamos stabilioms ląstelių linijoms kurti, nes gali veiksmingai amplifikuoti ir ekspresuoti egzogeninius genus, o tai labai svarbu norint gauti didelį rekombinantinių baltymų kiekį.

CHO-K1 Kinijos žiurkėnų ląsteles galima lengvai transfekuoti įvairiais vektoriais genų išraiškai, palengvinant genų redagavimą ar nušalinimą. Toks lankstumas leidžia mokslininkams CHO-K1 ląstelėse-šeimininkėse įdiegti specifinius genus, nutildyti genus ar net atlikti tikslinį genų redagavimą naudojant tokias technologijas kaip CRISPR-Cas9.

Apibendrinant galima teigti, kad Kinijos žiurkėnų CHO-K1 ląstelės ir CHO ląstelės yra labai svarbios biotechnologiniuose tyrimuose ir biofarmacinių preparatų gamyboje, nes yra universali platforma genų funkcijoms tirti ir dideliais kiekiais gaminti rekombinantinius baltymus.

Audinys
Kiaušidės
Paraiškos
Ši ląstelių linija yra optimalus pasirinkimas toksikologijai, pramoninei biotechnologijai ir bioprodukcijai.
Sinonimai
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Klasifikacija

Organizmas
Kinijos žiurkėnas
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Kariotipas
Chromosomų dažnio pasiskirstymas 50 ląstelių: 2n = 22. Kamienų skaičius yra hipodiploidinis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
22 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
CHO-K1 (Cytion katalogo numeris 603480)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Išraiška ir jautrumas

Jautrumas virusams
Vezikulinis stomatitas (Indiana), Getah virusas Atsparus virusams: poliovirusas 2, modoc virusas, Button Willow virusas
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilus glutaminas, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820600a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 6 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Suaugusiųjų