الانتقال إلى المحتوى
CHO-K1
الأنسجة
المبيض
المرادفات
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

المستندات

CHO-K1

Cell line · رقم المنتج 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا CHO-K1 هي سلالة فرعية مشتقة من خط خلايا CHO، والتي تم إنشاؤها في الأصل في أوائل الخمسينيات من القرن الماضي من مبيض الهامستر الصيني. تُستخدم خلايا CHO-K1 على نطاق واسع في إنتاج الأجسام المضادة أحادية النسيلة العلاجية وغيرها من المستحضرات الصيدلانية الحيوية. ويُعزى استخدامها على نطاق واسع في إنتاج البروتينات واللقاحات الصيدلانية الحيوية إلى طبيعتها حقيقية النواة التي تسمح بالطي والتجميع والتعديلات ما بعد الترجمة مثل الغليكوزيلات، مما يؤثر على استقرار البروتينات المنتجة وفعاليتها وسلامتها.

في مجال إنتاج البروتينات المؤتلفة، يُستخدم خط الخلايا CHO-K1 للتعبير عن مجموعة واسعة من البروتينات، بما في ذلك الأجسام المضادة وحيدة النسيلة وعوامل النمو والسيتوكينات والإنزيمات. ولهذه البروتينات تطبيقات في العلاجات العلاجية والمقايسات التشخيصية وتركيبات اللقاحات.

تُظهر خلايا CHO-K1 معدل نمو قوي وقابلة للتكيف مع ظروف الاستزراع المختلفة، بما في ذلك المزارع المعلقة والملتصقة، مما يجعلها ذات قيمة عالية لعمليات الإنتاج الحيوي على نطاق واسع. وهي تتمتع بمستوى عالٍ من الاستقرار الوراثي وتستخدم لتطوير خطوط الخلايا المستقرة لأنها قادرة على تضخيم الجينات الخارجية والتعبير عنها بكفاءة، وهو أمر بالغ الأهمية لإنتاج غلة عالية من البروتينات المؤتلفة.

يمكن نقل خلايا الهامستر الصيني CHO-K1 بسهولة باستخدام مجموعة متنوعة من النواقل للتعبير الجيني، مما يسهل تحرير الجينات أو القضاء عليها. وتسمح هذه المرونة للباحثين بإدخال جينات محددة، أو إسكات الجينات، أو حتى إجراء تعديل جيني مستهدف باستخدام تقنيات مثل CRISPR-Cas9 في الخلايا المضيفة CHO-K1.

وفي الختام، تُعد خلايا الهامستر الصيني CHO-K1 وخلايا CHO ذات دور محوري في أبحاث التكنولوجيا الحيوية وإنتاج الأدوية الحيوية، حيث توفر منصة متعددة الاستخدامات لدراسة وظيفة الجينات وإنتاج البروتينات المؤتلفة على نطاق واسع.

الأنسجة
المبيض
التطبيقات
يُعد هذا الخط الخلوي الخيار الأمثل لعلم السموم والتكنولوجيا الحيوية الصناعية والإنتاج الحيوي.
المرادفات
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02التصنيف

كائن حي
الهامستر الصيني
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
النمط الكروموسومي
توزيع تواتر الكروموسوم 50 خلية: 2ن = 22. عدد الصبغيات الجذعية ناقص الصبغيات
زمن المضاعفة
22 ساعة

04المعرّفات

المرجع
CHO-K1 (كتالوج سيتيون رقم 603480)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10029
سيلوصور
CVCL_0214

05التعبير والقابلية للإصابة

قابلية الإصابة بالفيروس
التهاب الفم الحويصلي (إنديانا)، فيروس جيتاه مقاوم للفيروسات: فيروس شلل الأطفال 2، فيروس مودوك، فيروس بوتون ويلو
إنزيم النسخ العكسي
سلبي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
هامز إف 12، ث: 1.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 1.0 مللي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.1 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة سيتيون 820600a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 6 أيام
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
للبالغين

قد تحتاج أيضًا إلى