Skip to content
CHO-K1
Tissue
Buồng trứng
Synonyms
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Documents

CHO-K1

Cell line · Product number 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào CHO-K1 là một dòng tế bào con được phân lập từ dòng tế bào CHO, vốn được thiết lập lần đầu vào những năm 1950 từ buồng trứng của chuột hamster Trung Quốc. Tế bào CHO-K1 được sử dụng rộng rãi trong sản xuất kháng thể đơn dòng điều trị và các loại dược phẩm sinh học khác. Sự sử dụng phổ biến của chúng trong sản xuất protein dược phẩm sinh học và vắc-xin là do bản chất eukaryotic của chúng, cho phép protein gấp nếp, lắp ráp và thực hiện các sửa đổi sau dịch mã như glycosyl hóa, những yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định, hiệu quả và an toàn của protein được sản xuất.

Trong lĩnh vực sản xuất protein tái tổ hợp, dòng tế bào CHO-K1 được sử dụng để biểu hiện một loạt các protein, bao gồm kháng thể đơn dòng, yếu tố tăng trưởng, cytokine và enzyme. Các protein này có ứng dụng trong điều trị y tế, xét nghiệm chẩn đoán và công thức vắc-xin.

Tế bào CHO-K1 có tốc độ tăng trưởng mạnh mẽ và thích nghi với nhiều điều kiện nuôi cấy, bao gồm nuôi cấy treo và nuôi cấy bám dính, khiến chúng trở nên vô cùng giá trị cho các quy trình sản xuất sinh học quy mô lớn. Chúng có mức độ ổn định di truyền cao và được sử dụng để phát triển dòng tế bào ổn định, vì chúng có khả năng khuếch đại và biểu hiện gen ngoại lai một cách hiệu quả, điều này rất quan trọng để sản xuất lượng lớn protein tái tổ hợp.

Tế bào CHO-K1 của chuột hamster Trung Quốc có thể được chuyển gen dễ dàng bằng nhiều loại vectơ cho biểu hiện gen, hỗ trợ chỉnh sửa gen hoặc ức chế gen. Sự linh hoạt này cho phép các nhà nghiên cứu giới thiệu các gen cụ thể, ức chế gen hoặc thậm chí thực hiện chỉnh sửa gen có mục tiêu bằng các công nghệ như CRISPR-Cas9 trong tế bào chủ CHO-K1.

Tóm lại, tế bào CHO-K1 và tế bào CHO của chuột hamster Trung Quốc đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu công nghệ sinh học và sản xuất dược phẩm sinh học, cung cấp một nền tảng đa năng cho việc nghiên cứu chức năng gen và sản xuất quy mô lớn protein tái tổ hợp.

Tissue
Buồng trứng
Applications
Dòng tế bào này là lựa chọn tối ưu cho độc học, công nghệ sinh học công nghiệp và sản xuất sinh học.
Synonyms
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Karyotype
Phân bố tần số nhiễm sắc thể trên 50 tế bào: 2n = 22. Số lượng dòng tế bào là hypodiploid
Doubling time
22 giờ

04Identifiers

Citation
CHO-K1 (Số catalog Cytion 603480)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
Viêm miệng túi (Indiana), Virus Getah Kháng virus: virus polio 2, virus Modoc, virus Button Willow
Reverse transcriptase
Tiêu cực

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12, chứa: 1,0 mM glutamine ổn định, chứa: 1,0 mM natri pyruvate, chứa: 1,1 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820600a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 x 10⁴ tế bào/cm² sẽ tạo thành một lớp tế bào dày đặc trong khoảng 6 ngày.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Người lớn