.jpg)
CHO-K1
Cell line · Product number 603480
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
Customization / Recommendations
- CHO-K1Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ CHO-K1 เป็นสายพันธุ์ย่อยที่ได้มาจากเซลล์ไลน์ CHO ซึ่งถูกสร้างขึ้นครั้งแรกในช่วงต้นทศวรรษ 1950 จากรังไข่ของหนูแฮมสเตอร์จีนเซลล์ CHO-K1 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการผลิตแอนติบอดีโมโนโคลนอลเชิงบำบัดและชีวเภสัชภัณฑ์อื่น ๆ การใช้งานอย่างกว้างขวางในกระบวนการผลิตโปรตีนสำหรับชีวเภสัชภัณฑ์และวัคซีนนั้น มีสาเหตุมาจากลักษณะของเซลล์ที่เป็นยูคาริโอต ซึ่งเอื้อให้เกิดการพับตัว การประกอบโครงสร้าง และการปรับเปลี่ยนหลังการแปลรหัสโปรตีน เช่น การเติมน้ำตาล (glycosylation) ได้อย่างเหมาะสม ปัจจัยเหล่านี้ส่งผลต่อความคงตัว ประสิทธิภาพ และความปลอดภัยของโปรตีนที่ผลิตได้
ในขอบเขตของการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ สายพันธุ์เซลล์ CHO-K1 ถูกนำมาใช้เพื่อแสดงออกโปรตีนหลากหลายชนิด รวมถึงแอนติบอดีโมโนโคลนอล, ปัจจัยการเจริญเติบโต, ไซโตไคน์, และเอนไซม์ โปรตีนเหล่านี้มีการประยุกต์ใช้ในด้านการรักษา, การทดสอบวินิจฉัย, และการพัฒนาวัคซีน
เซลล์ CHO-K1 แสดงอัตราการเจริญเติบโตที่แข็งแกร่งและสามารถปรับตัวเข้ากับสภาวะการเพาะเลี้ยงที่หลากหลาย รวมถึงการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอยและแบบเกาะติด ทำให้มีคุณค่าสูงสำหรับกระบวนการผลิตชีวภาพขนาดใหญ่ เซลล์เหล่านี้มีความเสถียรทางพันธุกรรมในระดับสูงและถูกใช้ในการพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ที่คงที่ เนื่องจากสามารถขยายและแสดงออกของยีนจากภายนอกได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในปริมาณสูง
เซลล์ CHO-K1 ของหนูแฮมสเตอร์จีนสามารถถูกทรานส์เฟคได้อย่างง่ายดายด้วยเวกเตอร์หลากหลายชนิดสำหรับการแสดงออกของยีน ซึ่งช่วยอำนวยความสะดวกในการแก้ไขยีนหรือการลดการแสดงออกของยีน ความยืดหยุ่นนี้ทำให้นักวิจัยสามารถแนะนำยีนเฉพาะ ปิดเสียงยีน หรือแม้กระทั่งทำการแก้ไขยีนแบบเฉพาะเจาะจงโดยใช้เทคโนโลยีเช่น CRISPR-Cas9 ในเซลล์โฮสต์ CHO-K1
โดยสรุป เซลล์ CHO-K1 ของหนูแฮมสเตอร์จีนและเซลล์ CHO มีความสำคัญอย่างยิ่งในการวิจัยทางเทคโนโลยีชีวภาพและการผลิตยาชีวเภสัชภัณฑ์ โดยเป็นแพลตฟอร์มที่หลากหลายสำหรับการศึกษาการทำงานของยีนและการผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ในปริมาณมาก
- Tissue
- รังไข่
- Applications
- สายเซลล์นี้เป็นตัวเลือกที่เหมาะสมที่สุดสำหรับการศึกษาพิษวิทยา เทคโนโลยีชีวภาพอุตสาหกรรม และการผลิตทางชีวภาพ
- Synonyms
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Karyotype
- การกระจายความถี่ของโครโมโซม 50 เซลล์: 2n = 22. หมายเลขสายพันธุ์เป็นไฮโพไดพลอยด์
- Doubling time
- 22 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- CHO-K1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 603480)
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_0214
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา), ไวรัสเกต้า ไวรัสที่ต้านทาน: โปลิโอไวรัส 2, ไวรัสโมด็อก, ไวรัสบัตตันวิลโลว์
- Reverse transcriptase
- เชิงลบ
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12, w: 1.0 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 1.0 mM โซเดียมไพรูเวต, w: 1.1 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820600a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 1 x 10^4 เซลล์/ซม. จะให้ชั้นเซลล์ที่หนาแน่นสมบูรณ์ในเวลาประมาณ 6 วัน
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- ผู้ใหญ่
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Disclaimer
- เซลล์ของเราจัดเตรียมไว้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวิจัยในห้องปฏิบัติการเท่านั้น และไม่ได้มีไว้สำหรับการใช้งานทางคลินิกหรือการวินิจฉัยโรค รวมถึงห้ามนำไปใช้กับมนุษย์หรือใช้ในทางสัตวแพทย์ ผู้ใช้ต้องปฏิบัติตามแนวทางและข้อบังคับที่เกี่ยวข้องทั้งหมดในการจัดการและใช้เซลล์เหล่านี้ในสภาพแวดล้อมการวิจัย
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
