CHO-K1
Cell line · Codice prodotto 603480
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
Personalizzazione / Suggerimenti
- CHO-K1Cell line€430.00
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01Informazioni generali
- Descrizione
Le cellule CHO-K1 sono una sotto-linea derivata dalla linea cellulare CHO, che è stata originariamente creata nei primi anni '50 a partire da un ovaio di criceto cinese. Le cellule CHO-K1 sono ampiamente utilizzate nella produzione di anticorpi monoclonali terapeutici e altri biofarmaci. Il loro ampio utilizzo nella produzione di proteine e vaccini biofarmaceutici è attribuito alla loro natura eucariotica, che consente un corretto ripiegamento, assemblaggio e modifiche post-traslazionali come la glicosilazione, che influenza la stabilità, l'efficacia e la sicurezza delle proteine prodotte.
Nel campo della produzione di proteine ricombinanti, la linea cellulare CHO-K1 viene utilizzata per esprimere un'ampia gamma di proteine, tra cui anticorpi monoclonali, fattori di crescita, citochine ed enzimi. Queste proteine trovano applicazione in trattamenti terapeutici, test diagnostici e formulazioni di vaccini.
Le cellule CHO-K1 presentano un tasso di crescita robusto e sono adattabili a varie condizioni di coltura, comprese quelle in sospensione e aderenti, il che le rende molto utili per i processi di bioproduzione su larga scala. Possiedono un elevato livello di stabilità genetica e sono utilizzate per lo sviluppo di linee cellulari stabili, in quanto sono in grado di amplificare ed esprimere in modo efficiente i geni esogeni, il che è fondamentale per produrre elevate rese di proteine ricombinanti.
Le cellule CHO-K1 di criceto cinese possono essere facilmente trasfettate con una varietà di vettori per l'espressione genica, facilitando l'editing o il knockdown genico. Questa flessibilità consente ai ricercatori di introdurre geni specifici, silenziare geni o persino eseguire un editing genico mirato utilizzando tecnologie come CRISPR-Cas9 nelle cellule ospiti CHO-K1.
In conclusione, le cellule CHO-K1 di criceto cinese e le cellule CHO sono fondamentali per la ricerca biotecnologica e la produzione biofarmaceutica, in quanto offrono una piattaforma versatile per lo studio della funzione genica e la produzione su larga scala di proteine ricombinanti.
- Tessuto
- Ovaio
- Applicazioni
- Questa linea cellulare è una scelta ottimale per la tossicologia, la biotecnologia industriale e la bioproduzione.
- Sinonimi
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Classificazione
- Organismo
- Criceto cinese
- Sesso
- Donna
- Proprietà di crescita
- Aderente
- Livello di biosicurezza
- 1
03Caratteristiche
- Morfologia
- Simile all'epitelio
- Cariotipo
- Distribuzione della frequenza cromosomica 50 cellule: 2n = 22. Il numero di staminali è ipodiploide
- Tempo di raddoppio
- 22 ore
04Identificatori
- Riferimento bibliografico
- CHO-K1 (catalogo Cytion numero 603480)
- Codice fiscale NCBI
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_0214
05Espressione e suscettibilità
- Suscettibilità ai virus
- Stomatite vescicolare (Indiana), Getah virus Virus Resist: poliovirus 2, modoc virus, Button Willow virus
- Trascriptasi inversa
- Negativo
06Manipolazione e coltura
- Terreno di coltura
- Ham's F12, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,1 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820600a)
- Atmosfera di incubazione
37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.
- Integratori
- Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
- Reagente di dissociazione
- Accutase
- Subcoltura
- Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
- Densità di semina
- 1 x 104 cellule/cm2 produrrà uno strato confluente in circa 6 giorni
- Rinnovo dei fluidi
- da 2 a 3 volte alla settimana
- Recupero post-scongelamento
- Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
- Scongelamento e coltura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controllo di qualità e crioconservazione
- Sterilità
La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.
Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.
- Terreno di coltura congelato
- Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
- Condizioni di conservazione
Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.
- Condizioni di spedizione
Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
08Donatore
- Età dei donatori
- Adulti
09Aspetti legali e di sicurezza
- Misure di sicurezza
- Quando si prevede di conservare una crioviale in azoto liquido per un futuro scongelamento, è obbligatorio attenersi a rigorose misure di sicurezza. Guanti e indumenti protettivi appropriati sono essenziali e l'uso di una maschera facciale o di occhiali di sicurezza è richiesto durante il trasferimento dei campioni congelati da o verso il serbatoio di azoto liquido. Questo per ridurre il rischio di lesioni dovute a potenziali esplosioni di crioviali al momento della rimozione, che possono provocare la proiezione di frammenti taglienti.
- Dichiarazione di non responsabilità
- Le nostre cellule sono fornite esclusivamente per scopi di ricerca di laboratorio in vitro e non sono destinate all'uso clinico o diagnostico, né devono essere somministrate all'uomo o utilizzate per scopi veterinari. Gli utenti devono attenersi a tutte le linee guida e le normative applicabili per la manipolazione e l'uso di queste cellule in un contesto di ricerca.
- Garanzia
Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto
Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia
- È richiesto un accordo di trasferimento di materiale
- Sì
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