.jpg)
CHO-K1
Cell line · Številka izdelka 603480
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
Prilagajanje / Priporočila
- CHO-K1Cell line€430.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
Celice CHO-K1 so podlinija, pridobljena iz celične linije CHO, ki je bila prvotno ustvarjena v zgodnjih petdesetih letih prejšnjega stoletja iz jajčnika kitajskega hrčka. Celice CHO-K1 se pogosto uporabljajo pri proizvodnji terapevtskih monoklonskih protiteles in drugih biofarmacevtskih izdelkov. Njihova široka uporaba pri proizvodnji biofarmacevtskih beljakovin in cepiv je posledica njihove evkariontske narave, ki omogoča pravilno zlaganje, sestavljanje in posttranslacijske spremembe, kot je glikozilacija, kar vpliva na stabilnost, učinkovitost in varnost proizvedenih beljakovin.
Na področju proizvodnje rekombinantnih beljakovin se celična linija CHO-K1 uporablja za izražanje široke palete beljakovin, vključno z monoklonskimi protitelesi, rastnimi faktorji, citokini in encimi. Te beljakovine se uporabljajo pri terapevtskih postopkih, diagnostičnih testih in formulacijah cepiv.
Celice CHO-K1 imajo visoko stopnjo rasti in so prilagodljive različnim pogojem gojenja, vključno s suspenzijskimi in adherentnimi kulturami, zaradi česar so zelo dragocene za obsežne postopke bioproizvodnje. Imajo visoko stopnjo genetske stabilnosti in se uporabljajo za razvoj stabilnih celičnih linij, saj so sposobne učinkovito amplificirati in izražati eksogene gene, kar je ključno za proizvodnjo visokih donosov rekombinantnih beljakovin.
Celice kitajskega hrčka CHO-K1 je mogoče enostavno transficirati z različnimi vektorji za izražanje genov, kar olajša urejanje ali izločanje genov. Ta prilagodljivost raziskovalcem omogoča, da v gostiteljske celice CHO-K1 vnesejo določene gene, utišajo gene ali celo izvajajo ciljno urejanje genov s tehnologijami, kot je CRISPR-Cas9.
Če povzamemo, so celice kitajskega hrčka CHO-K1 in celice CHO ključne pri biotehnoloških raziskavah in biofarmacevtski proizvodnji, saj ponujajo vsestransko platformo za preučevanje delovanja genov in obsežno proizvodnjo rekombinantnih beljakovin.
- Tkivo
- Jajčnik
- Uporaba
- Ta celična linija je optimalna izbira za toksikologijo, industrijsko biotehnologijo in bioprodukcijo.
- Sinonimi
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Razvrstitev
- Organizem
- kitajski hrček
- Seks
- Ženska
- Lastnosti rasti
- Pripadnik
- Stopnja biološke varnosti
- 1
03Značilnosti
- Morfologija
- Epitelijam podobni
- Kariotip
- Porazdelitev pogostosti kromosomov 50 celic: 2n = 22. Stebelno število je hipodiploidno
- Čas podvojitve
- 22 ur
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- CHO-K1 (kataloška številka Cytion 603480)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_0214
05Izražanje in dovzetnost
- Občutljivost na virus
- Vesikularni stomatitis (Indiana), Getah virus Odpornost na viruse: poliovirus 2, modoc virus, Button Willow virus
- Reversna transkriptaza
- Negativni
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- Ham's F12, w: 1,0 mM stabilnega glutamina, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 1,1 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820600a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % FBS
- Reagenca za disociacijo
- Accutase
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
- Gostota setve
- 1 x 104 celic/cm2 bo v približno 6 dneh tvorilo konfluentno plast.
- Obnova tekočine
- 2 do 3-krat na teden
- Obnova po odtaljevanju
- Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- Odrasli
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Izjava o omejitvi odgovornosti
- Naše celice so na voljo izključno za laboratorijske raziskave in vitro in niso namenjene za klinično ali diagnostično uporabo, niti jih ni dovoljeno dajati ljudem ali uporabljati v veterinarske namene. Uporabniki morajo upoštevati vse veljavne smernice in predpise za ravnanje in uporabo teh celic v raziskovalnem okolju.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da
