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CHO-K1
Tissu
Ovaire
Synonymes
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

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CHO-K1

Cell line · Référence du produit 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00hors taxes et frais de port
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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules CHO-K1 sont une sous-ligne dérivée de la lignée cellulaire CHO, qui a été créée au début des années 1950 à partir d'un ovaire de hamster chinois. Les cellules CHO-K1 sont largement utilisées dans la production d'anticorps monoclonaux thérapeutiques et d'autres produits biopharmaceutiques. Leur utilisation intensive dans la production de protéines biopharmaceutiques et de vaccins est attribuée à leur nature eucaryote, qui permet un pliage, un assemblage et des modifications post-traductionnelles appropriées, telles que la glycosylation, qui influencent la stabilité, l'efficacité et la sécurité des protéines produites.

Dans le domaine de la production de protéines recombinantes, la lignée cellulaire CHO-K1 est utilisée pour exprimer un large éventail de protéines, notamment des anticorps monoclonaux, des facteurs de croissance, des cytokines et des enzymes. Ces protéines ont des applications dans les traitements thérapeutiques, les tests de diagnostic et les formulations de vaccins.

Les cellules CHO-K1 présentent un taux de croissance élevé et s'adaptent à diverses conditions de culture, y compris les cultures en suspension et les cultures adhérentes, ce qui les rend très utiles pour les processus de bioproduction à grande échelle. Elles possèdent un niveau élevé de stabilité génétique et sont utilisées pour le développement de lignées cellulaires stables car elles sont capables d'amplifier et d'exprimer efficacement des gènes exogènes, ce qui est essentiel pour produire des rendements élevés de protéines recombinantes.

Les cellules CHO-K1 de hamster chinois peuvent être facilement transfectées avec une variété de vecteurs pour l'expression des gènes, ce qui facilite l'édition ou l'élimination des gènes. Cette flexibilité permet aux chercheurs d'introduire des gènes spécifiques, de réduire des gènes au silence ou même d'effectuer une édition ciblée des gènes à l'aide de technologies telles que CRISPR-Cas9 dans les cellules hôtes CHO-K1.

En conclusion, les cellules CHO-K1 de hamster chinois et les cellules CHO sont essentielles à la recherche biotechnologique et à la production biopharmaceutique, offrant une plateforme polyvalente pour l'étude de la fonction des gènes et la production à grande échelle de protéines recombinantes.

Tissu
Ovaire
Applications
Cette lignée cellulaire est un choix optimal pour la toxicologie, la biotechnologie industrielle et la bioproduction.
Synonymes
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Classification

Organisme
Hamster chinois
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Caryotype
Distribution de la fréquence des chromosomes 50 cellules : 2n = 22. Le nombre de souches est hypodiploïde
Temps de doublement
22 heures

04Identifiants

Référence
CHO-K1 (numéro de catalogue 603480 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
Stomatite vésiculaire (Indiana), virus Getah Résistance aux virus : poliovirus 2, virus modoc, virus du saule à boutons
Transcriptase inverse
Négatif

06Manipulation et culture

Milieu de culture
Ham's F12, w : 1.0 mM Glutamine stable, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium, w : 1.1 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820600a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 produira une couche confluente en environ 6 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Adulte