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CHO-K1
Cell line · Product number 603480
CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...
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01General information
- Description
CHO-K1 細胞是源自 CHO 細胞系的亞系，該細胞系最初於 1950 年代初期由中國倉鼠卵巢建立。CHO-K1 細胞廣泛應用於治療性單克隆抗體及其他生物製劑的生產。 該細胞系在生物製劑蛋白質生產及疫苗製造中被廣泛應用，這歸因於其真核細胞的特性，此特性能確保蛋白質正確摺疊、組裝，並進行糖基化等翻譯後修飾，這些過程皆會影響所生產蛋白質的穩定性、療效及安全性。
在重組蛋白生產領域，CHO-K1 細胞系被用於表達多種蛋白質，包括單克隆抗體、生長因子、細胞因子及酶。這些蛋白質可應用於治療、診斷檢測及疫苗製劑。
CHO-K1 細胞具有強勁的生長速率，並能適應各種培養條件，包括懸浮培養和貼壁培養，使其在大規模生物生產過程中極具價值。 該細胞線具有高度的遺傳穩定性，並被用於開發穩定細胞系，因其能高效擴增及表達外源基因，這對於高產量生產重組蛋白至關重要。
中國倉鼠 CHO-K1 細胞可輕鬆轉染多種載體以進行基因表達，從而促進基因編輯或基因敲低。這種靈活性使研究人員能夠在 CHO-K1 宿主細胞中導入特定基因、沉默基因，甚至利用 CRISPR-Cas9 等技術進行靶向基因編輯。
總而言之，中國倉鼠 CHO-K1 細胞與 CHO 細胞在生物技術研究及生物製藥生產中扮演關鍵角色，為基因功能研究及重組蛋白的大規模生產提供了多功能的平台。
- Tissue
- 卵巢
- Applications
- 該細胞系是毒理學、工業生物技術及生物生產領域的最佳選擇。
- Synonyms
- CHO K1
- CHOK1
- CHO cell clone K1
- GM15452
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
- Karyotype
- 50 個細胞的染色體頻率分佈：2n = 22。該系號為次二倍體
- Doubling time
- 22 小時
04Identifiers
- Citation
- CHO-K1（Cytion 型號 603480）
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_0214
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- 水疱性口炎（印第安納州），蓋塔病毒 抗病毒性：小兒麻痺病毒 2 型、莫多克病毒、鈕扣柳病毒
- Reverse transcriptase
- 否
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12，含：1.0 mM 穩定型谷氨醯胺、1.0 mM 丙酮酸鈉、1.1 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820600a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm² 約需 6 天即可形成密合的細胞層
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 成人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用，不得用於臨床或診斷用途，亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
