Siirry sisältöön
CHO-K1
Kudos
Munasarja
Synonyymit
CHO K1, CHOK1, CHO cell clone K1, GM15452

Asiakirjat

CHO-K1

Cell line · Tuotenumero 603480

CHO-K1 cells are a subline derived from the CHO cell line, which was originally established in the early 1950s from a Chinese hamster ovary. CHO-K1 cells ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CHO-K1-solut ovat alalinja, joka on peräisin CHO-solulinjasta, joka on alun perin luotu 1950-luvun alussa kiinalaisen hamsterin munasarjasta. CHO-K1-soluja käytetään laajalti terapeuttisten monoklonaalisten vasta-aineiden ja muiden biolääkkeiden tuotannossa. Niiden laajamittainen käyttö biofarmaseuttisten proteiinien ja rokotteiden tuotannossa johtuu niiden eukaryoottisesta luonteesta, joka mahdollistaa niiden asianmukaisen taittumisen, kokoonpanon ja posttranslationaaliset modifikaatiot, kuten glykosylaation, jotka vaikuttavat tuotettujen proteiinien vakauteen, tehokkuuteen ja turvallisuuteen.

Rekombinanttiproteiinien tuotannossa CHO-K1-solulinjaa käytetään monenlaisten proteiinien, kuten monoklonaalisten vasta-aineiden, kasvutekijöiden, sytokiinien ja entsyymien ilmentämiseen. Näitä proteiineja käytetään terapeuttisissa hoidoissa, diagnostisissa testeissä ja rokotevalmisteissa.

CHO-K1-soluilla on voimakas kasvunopeus, ja ne soveltuvat erilaisiin viljelyolosuhteisiin, kuten suspensio- ja adheesioviljelmiin, mikä tekee niistä erittäin arvokkaita laajamittaisissa biotuotantoprosesseissa. Niillä on korkea geneettinen stabiilisuus, ja niitä käytetään vakaiden solulinjojen kehittämiseen, koska ne pystyvät monistamaan ja ilmentämään eksogeenisia geenejä tehokkaasti, mikä on ratkaisevan tärkeää rekombinanttiproteiinien suurten saantojen tuottamiseksi.

CHO-K1-kiinanhamsterisolut voidaan helposti transfektoida erilaisilla vektoreilla geeniekspressiota varten, mikä helpottaa geenieditointia tai knockdownia. Tämän joustavuuden ansiosta tutkijat voivat tuoda CHO-K1-isäntäsoluihin tiettyjä geenejä, hiljentää geenejä tai jopa suorittaa kohdennettua geenieditointia CRISPR-Cas9:n kaltaisilla tekniikoilla.

Yhteenvetona voidaan todeta, että kiinalaisen hamsterin CHO-K1-solut ja CHO-solut ovat keskeisiä bioteknologisessa tutkimuksessa ja biolääkkeiden tuotannossa, sillä ne tarjoavat monipuolisen alustan geenien toiminnan tutkimiseen ja rekombinanttiproteiinien laajamittaiseen tuotantoon.

Kudos
Munasarja
Sovellukset
Tämä solulinja on optimaalinen valinta toksikologiaan, teolliseen biotekniikkaan ja biotuotantoon.
Synonyymit
  • CHO K1
  • CHOK1
  • CHO cell clone K1
  • GM15452

02Luokittelu

Organismi
kiinalainen hamsteri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Karyotyyppi
Kromosomien frekvenssijakauma 50 solua: 2n = 22. Kantasolumäärä on hypodiploidi
Kaksinkertaistumisaika
22 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
CHO-K1 (Cytionin luettelonumero 603480)
NCBI-verotunnus
10029
Cellosaurus
CVCL_0214

05Ilmentyminen ja alttius

Viruksille altistuminen
Vesicular stomatitis (Indiana), Getah-virus Virus Resistenssi: poliovirus 2, modoc-virus, Button Willow -virus
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820600a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 6 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset